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病毒滴度測(cè)定方法
最近更新時(shí)間:2013-1-7
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測(cè)定病毒滴度方法有空斑、TCID50(半數(shù)組織培養(yǎng)物感染劑量),具體的要看你是什么病毒、敏感細(xì)胞是什么。
空斑檢測(cè)的是具有感染力的病毒粒子數(shù)量,是病毒滴度檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。空斑形成單位(Plaque-forming unit,PFU)測(cè)定是一種測(cè)定病毒感染性比較準(zhǔn)確的方法,將適當(dāng)濃度的病毒懸液接種到生長(zhǎng)單層細(xì)胞的培養(yǎng)板、玻璃平皿或扁瓶中,當(dāng)病毒吸附于細(xì)胞上后,再在其上復(fù)蓋一層溶化的半固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂層,待凝固后,孵育培養(yǎng)。當(dāng)病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖后,每一個(gè)感染性病毒顆粒在單層細(xì)胞中產(chǎn)生一個(gè)局限性的感染細(xì)胞病灶,病灶逐漸擴(kuò)大,若用中性紅等活性染料著色,在紅色的的背景中顯出沒有著色的“空斑”,清楚可見。由于每個(gè)空斑由單個(gè)病毒顆粒復(fù)制形成,所以病毒懸液的滴度可以用每毫升空斑形成單位(PFU)來表示;
TCID50也可以計(jì)算病毒滴度,其滴度值理論上為半個(gè)具有感染力的病毒粒子數(shù)量的稀釋值,理論上即可換算為logTCID50=log plaque+0.67
此外,一些病毒還有其它較為粗放的滴度檢測(cè)方法,如血凝效價(jià)、OD280等。
詳情請(qǐng)看:病毒滴度測(cè)定方法