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伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基的配置方法說明書

最近更新時(shí)間:2011-9-13

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常用的伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基,可用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細(xì)菌。如果有大腸桿菌,因其強(qiáng)烈分解乳糖而產(chǎn)生大量的混合酸,菌體帶H+,故菌落被染成深紫色,從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。

 

伊紅為酸性染料,美藍(lán)為堿性染料。 當(dāng)大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)細(xì)菌帶正電荷被染成紅色,再與美藍(lán)結(jié)合形成紫黑色菌落,并帶有綠色金屬光澤。而產(chǎn)氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。在堿性環(huán)境中不分解乳糖產(chǎn)酸的細(xì)菌不著色,伊紅和美藍(lán)不能結(jié)合,故沙門氏菌等為無色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培養(yǎng)基上不生長。

 

伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基配置方法如下:

 

1、材料:蛋白胨 10g ;磷酸氫二鉀 2g ;瓊脂 20~30g ;蒸餾水 1000ml ;2%伊紅水溶液 20ml ;0.5 %美藍(lán)水溶液 13ml 。

 

2、儲(chǔ)備培養(yǎng)基的制備:先將瓊脂加至900ml蒸餾水,加熱溶解,然后加入磷酸氫二鉀及蛋白胨,混勻使之溶解,再以蒸餾水補(bǔ)足至1000ml,調(diào)整PH為7.2~7.4。趁熱用脫脂棉或絨布過濾,再加入乳糖,混勻后定量分裝于燒瓶內(nèi),置高壓蒸汽滅菌器內(nèi)以115℃滅菌20min,貯存于冷暗處備用。

 

3、制法:將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正PH,分裝于燒瓶內(nèi),121℃高壓滅菌15min備用。臨用時(shí)加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷至50~55℃,加入伊紅和美藍(lán)溶液,搖勻,傾注平板。
 

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