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人腫瘤壞死因子操作使用說明

最近更新時間:2014-8-12

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人腫瘤壞死因子操作使用說明

人腫瘤壞死因子操作步驟:

1.取出酶標板,設空白孔,依照次序?qū)謩e加入100μl的標準品于空白微孔中(空白孔視為0號標準品,用醫(yī)用蒸餾水替代

2、分別標記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。

3、將酶標板置于37溫育30分鐘;

4、將酶標板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體;

5、每個孔中加滿應用洗滌液后,輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。

6、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。

7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。

8、將96孔板置于37溫育30分鐘。

9、將酶標板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體。

10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后,室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。

11、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。

12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。A液、B液采用不同的吸頭加樣)

13、將酶標板置于37避光溫育反應15分鐘。

14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。

15、在酶標儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內(nèi)進行測定。

16、根據(jù)制備的標準曲線,計算樣本含量

人腫瘤壞死因子結(jié)果判斷:

1. 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;

2、檢測值范圍:0800pg/ml

3、敏感度:1.0pg/ml

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