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人腫瘤壞死因子操作使用說明
最近更新時間：2014-8-12
提 供 商：上海研生實業(yè)有限公司資料大?。?/span>27.2KB
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人腫瘤壞死因子操作步驟：
1．取出酶標板，設空白孔，依照次序?qū)謩e加入100μl的標準品于空白微孔中（空白孔視為0號標準品，用醫(yī)用蒸餾水替代）
2、分別標記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）。
3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘；
4、將酶標板板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應用洗滌液后，立即甩去液體;
5、每個孔中加滿應用洗滌液后，輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。
6、重復第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。
7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應用洗滌液后，立即甩去液體。
10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后，室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。
11、重復第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。
12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）
13、將酶標板置于37℃避光溫育反應15分鐘。
14、每個微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。
15、在酶標儀上，450nm處測定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進行測定。
16、根據(jù)制備的標準曲線，計算樣本含量
人腫瘤壞死因子結(jié)果判斷：
1. 儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值；
2、檢測值范圍：0－800pg/ml
3、敏感度：1.0pg/ml