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大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3ELISA試劑盒使用說(shuō)明

最近更新時(shí)間：2014-8-11

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大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3ELISA試劑盒使用說(shuō)明

    神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3（NT-3）是神經(jīng)生長(zhǎng)因子基因家族起著重要的作用，這在脊椎動(dòng)物的神經(jīng)系統(tǒng)的開(kāi)發(fā)和維護(hù)的一個(gè)新成員。NT-3和受體，神經(jīng)酪氨酸激酶受體3（NTRK3，也稱為元TrkC），和整個(gè)胚胎發(fā)育早期表示。NT-3是一個(gè)5的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的生長(zhǎng)因子，塑造通過(guò)調(diào)節(jié)神經(jīng)元的存活和分化的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)展。NT-3可以是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)源性因子介導(dǎo)神經(jīng)嵴（NC）的細(xì)胞增殖，在體內(nèi)。NT-3已被映射到人類染色體12p和小鼠染色體6。

產(chǎn)品代碼： 2901180015，2901180045

大?。?nbsp; 96T，48T

范圍：   15.6pg/ml-1000pg/ml
靈敏度：    <2pg/ml中心
特異性：  沒(méi)有檢測(cè)到交叉反應(yīng)性與NT-4 <2.5％，沒(méi)有檢測(cè)到與任何其他細(xì)胞因子的交叉反應(yīng)性。
儲(chǔ)存：       存放在4 ℃ 的頻繁使用，在-20 ℃ 很少使用。  避免多次凍融循環(huán)（隨用濕冰）
有效期： 4個(gè)月，在4 ℃ 和8個(gè)月，在-20 ℃ 。
應(yīng)用范圍：  對(duì)于定量檢測(cè)在大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3 的血清，血漿，體液，組織裂解物或細(xì)胞培養(yǎng)物上清。
注意事項(xiàng)應(yīng)用套件
1 。在使用試劑盒，旋轉(zhuǎn)管到管底，并關(guān)閉所有元件。
2 。重復(fù)以及檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和樣品測(cè)試。
3 ，不要讓96孔板中干，干板將活性成分失活板。
4 。為了避免邊際效應(yīng)的板孵化，由于溫度差（反應(yīng)可能會(huì)更強(qiáng)的邊際井），ABC和TMB的解決方案攤薄預(yù)先加熱，在37 ℃ 30分鐘前使用。
大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3 ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟：
 
ABC工作液和TMB彩色顯影劑必須在使用前30分鐘在37℃下保溫。稀釋樣品和試劑時(shí)，必須將它們*和均勻地混合。標(biāo)準(zhǔn)曲線。用戶將決定由粗略的估計(jì)中的樣品稀釋倍。
 
1。每孔分裝0.1毫升1000pg/ml，500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.2pg/ml，15.6pg/ml大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3 到預(yù)涂的96孔板中的標(biāo)準(zhǔn)溶液。加入0.1ml的樣品稀釋緩沖液控制（零井）。每個(gè)人血清，血漿，體液，組織裂解物或細(xì)胞培養(yǎng)上清液適當(dāng)稀釋后的樣品加入0.1ml的每個(gè)空的。“樣品稀釋指引”上面的內(nèi)容，我們建議每個(gè)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3 標(biāo)準(zhǔn)的解決方案，每個(gè)樣本一式兩份測(cè)定。 
2。密封板與蓋和在37℃下孵育90分鐘。 
3。取下蓋子，舍棄板的內(nèi)容，涂抹到紙巾或其它吸水材料板。不要讓我們的井*干燥，在任何時(shí)候。 
4。加入0.1ml的生物素標(biāo)記的抗大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3 抗體工作溶液導(dǎo)入各孔中，并 在37℃下孵育板60分鐘。 
5。三次用0.01M TBS或0.01M PBS洗板，每一次讓留在洗滌緩沖液井1分鐘。棄去洗滌液，或其他吸水紙巾上吸干板材料。  
6。導(dǎo)入各孔中，并加入0.1ml的制備ABC工作液，在37℃下孵育板30分鐘。 
7。將板洗滌5次，用0.01M TBS或0.01M PBS，每一次讓洗滌緩沖液的孔中逗留1-2分鐘。棄去洗滌液和紙巾或其它吸水材料上涂抹板。 
8。90微升制備TMB底彩色顯影劑添加到每個(gè)孔中并孵育板在37℃下15分鐘（深淺不一的藍(lán)，可以看到在井的四個(gè)zui集中的大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3 標(biāo)準(zhǔn)的解決方案， 其他水井沒(méi)有明顯的顏色）。 
9。每孔加入0.1ml的準(zhǔn)備TMB的一站式解決方案。顏色立即變成黃色。 
10。閱讀的OD在酶標(biāo)儀在450nm處的吸光度，添加停止溶液后，在30分鐘之內(nèi)。
 
為了計(jì)算，（相對(duì)OD 450 ）=（的OD 450 ） - （的OD 450 ）。可以繪制成的相對(duì)OD 標(biāo)準(zhǔn)曲線。的大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3的濃度的樣品可以被內(nèi)插。      
 
注：如果測(cè)量的樣品進(jìn)行稀釋，稀釋前，乘以稀釋倍數(shù)的濃度插值獲得的濃度。

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