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96孔板質(zhì)粒DNAout
最近更新時(shí)間:2013-6-26
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96孔板質(zhì)粒DNAout
產(chǎn)品及特點(diǎn) 本試劑盒本產(chǎn)品是基于經(jīng)典堿變法的高通量質(zhì)粒DNA提取試劑盒,一次可以處理多達(dá)96個(gè)樣品,尤其適合處理量大的工業(yè)客戶(hù),包括測(cè)序公司。本產(chǎn)品的主要特點(diǎn)是:
1. 高通量,一次處理96個(gè)樣品。
2. 吸附量高,一個(gè)吸附空zui多可以吸附30-50 ug的質(zhì)粒DNA。
3. DNA純度高,幾乎沒(méi)有基因組DNA和RNA污染,OD260/280一般在1.7-1.9之間,完滿(mǎn)足一般分子生物學(xué)的要求。
4. DNA可以直接用于電泳、酶切、PCR、細(xì)菌轉(zhuǎn)化、分子克隆等實(shí)驗(yàn)。
5. 重復(fù)性和穩(wěn)定性好。
規(guī)格及成分 成份 1次包裝(CAT#:80916-1)
溶液A 25 mL
溶液B 25 mL
溶液C 35 mL
RNase A溶液
(10 mg/mL) 0.3 mL
96孔板(一塊吸附板兩塊收集板) 1套
通用洗柱液 100 mL
DNA洗脫液2.0 10 mL
使用手冊(cè) 1份
運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存;但RNase A溶液放4℃。
自備試劑 無(wú)
使用方法 1. 先將菌液轉(zhuǎn)移到96孔板的一塊收集板中,每個(gè)孔中加入0.1-1 mL菌液,直到96個(gè)樣品全部加入。
2. 室溫1000-5000×g離心2分鐘,用排槍小心吸棄上清。
3. 用排槍在每個(gè)收集孔的細(xì)菌沉淀中加0.2 mL的溶液A(使用前需要將0.6 mL的RNase A溶液全部加到30 mL溶液A中并充分搖勻混勻),充分吹打混勻使細(xì)菌懸浮。
4. 用排槍在每個(gè)收集孔中加0.2 mL的溶液B(如果有沉淀,用前須37℃加熱溶解后冷卻到室溫方可使用),輕柔吹打混勻,直到菌液變得清亮透明。注意:不要?jiǎng)×掖荡?,否則基因組DNA將斷裂成小片段,zui后污染質(zhì)粒DNA。
5. 用排槍在每個(gè)收集孔中加0.3 mL的溶液C,輕柔吹打混勻。冰上放置3-5分鐘。室溫放置也可以,但效果稍差。
6. 室溫1000-5000×g離心5分鐘。
7. 小心用排槍將上清轉(zhuǎn)移到96孔板的吸附板中,注意孔與孔的對(duì)應(yīng)關(guān)系。
8. 套上剛使用過(guò)的收集板,室溫1000-5000×g離心5分鐘,棄收集板中的穿透液。
9. 用排槍在每個(gè)收集孔中加0.5 mL通用洗柱液,室溫1000-5000×g離心2分鐘,棄收集板中的穿透液。
10. 重復(fù)上步操作一次。
11. 干甩一次(不加任何溶液而離心套上收集板的吸附板)以去除殘留洗柱液。注意:此步很重要,否則殘留洗柱液將會(huì)嚴(yán)重影響質(zhì)粒DNA的后續(xù)使用。
12. 用排槍在每個(gè)收集孔中加100 uL DNA洗脫液,室溫放置2-5分鐘。如果65℃預(yù)熱DNA洗脫液后再使用,洗脫效果更好。
13. 套上一塊還沒(méi)使用的干凈收集板,室溫1000-5000×g離心5分鐘即得質(zhì)粒DNA。