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肺炎衣原體ELISA法檢測(cè)步驟
點(diǎn)擊次數(shù)：1009 發(fā)布時(shí)間：2015-12-9
肺炎衣原體感染廣泛存在于*，以隱性感染為主。其臨床表現(xiàn)多樣，主要引起人非典型肺炎，還可引起咽炎、支氣管炎、虹膜炎、肝炎、心內(nèi)膜炎及結(jié)節(jié)性紅斑等，亦是艾滋病、白血病等疾病繼發(fā)感染的重要病原，且與冠心病的發(fā)生相關(guān)，嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康。常見(jiàn)檢查方法為ELISA法檢測(cè)肺炎衣原體抗體。ELISA試劑盒
1. 配制洗滌液 l瓶濃縮洗滌液加475ml蒸餾水。配好的洗滌液短期內(nèi)可置室溫環(huán)境中，長(zhǎng)期可存于2—8℃環(huán)境中。
2. 配制酶聯(lián)物 按1：101倍稀釋?zhuān)慈?u1濃縮酶聯(lián)物加酶聯(lián)物稀釋液1 000ul(根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定稀釋量)，未用完的丟棄。
3．待試劑盒平衡至室溫后，待測(cè)標(biāo)本按1；51稀釋?zhuān)慈?tA血清與200u1標(biāo)本稀釋液混合。
4. 將稀釋標(biāo)本置37℃環(huán)境中20min。
5. 各加100ul陽(yáng)性、弱陽(yáng)性、陰性對(duì)照及已稀釋待測(cè)標(biāo)本上清液于相應(yīng)孔中，空白對(duì)照孔加100u1標(biāo)本稀釋液，蓋好反應(yīng)板，置37℃環(huán)境中30min。ELISA試劑盒
6. 甩盡板中液體，每孔用200～300ul洗滌液洗5次，每次均需拍干。
每孔加酶聯(lián)物100~1，蓋好反應(yīng)板，置37℃環(huán)境中30min。
8．甩盡板中液體，洗5次，每次拍干。
9. 加底物A、B各1滴或各50tzl，混勻，置37℃環(huán)境中15min。
10．取出，加終止液1滴，用酶標(biāo)儀450nm測(cè)其OD值。若肉眼觀察則不加終止液，直接判斷結(jié)果。
注意事項(xiàng)：
1．本實(shí)驗(yàn)結(jié)果須結(jié)合臨床表現(xiàn)、病史作出診斷后，方可采取適當(dāng)臨床處理。
2 . 試劑盒雖然含有消除干擾因子的物質(zhì)，但仍可能有少量標(biāo)本難以除盡干擾。因此，如某標(biāo)本多項(xiàng)IgM均為陽(yáng)性，應(yīng)考慮RF的干擾。ELISA試劑盒