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技術(shù)文章
純上皮細胞的培養(yǎng)方法
點擊次數(shù)：1082 發(fā)布時間：2015-9-30
因此培養(yǎng)在有膠原的底物上可能利于生長，另外人或小鼠表皮在以3T3細胞為飼養(yǎng)層（用射線照射后）時，細胞易生長并可發(fā)生一定程度的分化現(xiàn)象。降低PH、Ca2 含量和溫度，向培養(yǎng)基中加入表皮生長因子，均有利于表皮細胞生長。
以表皮細胞為例，用皮膚表皮和分離培養(yǎng)法可獲得純上皮細胞，方法如下：
1、 取材：外科植皮或手術(shù)殘余皮膚小塊，早產(chǎn)流產(chǎn)兒皮膚更好，去角化層薄者，切成0.5-1平方厘米小塊。
2、置0.02%EDTA中，室溫，5分鐘。
3、換入0.25%胰蛋白酶中，4攝氏度。
4、分離：取出皮塊，用血管鉗或鑷子將表皮與層分開。
5、取出表皮，剪成更小的塊后，置0.25&胰酶中，37攝氏度，30-60分鐘。
6、反復吹打，制成懸液。
7、培養(yǎng)：用80目不銹鋼紗網(wǎng)濾過后，低速離心，吸去上清。
8、直接加入培養(yǎng)基細胞懸液，接種入培養(yǎng)瓶，CO2溫箱培養(yǎng)。主要的客戶是醫(yī)學院校，做實行面向的種屬重要是人，大鼠和小鼠，如今市面市情上雞、牛、馬、羊、兔種種指標的盒子都有售，真不知道這些抗體是怎么來的。據(jù)我所相識，這些炎癥指標依然有很大種屬特異性的。