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陰性染色產(chǎn)生的原因
點擊次數(shù)：1749 發(fā)布時間：2015-7-31
我先用石蠟切片做了5次，結(jié)果一直不理想（表現(xiàn)為未見特異性強染色）；近幾日，我又切了冰凍切片，做了2次，終于基本成功了。在這個過程中，我對免疫熒光染色技術(shù)有了全新的認識，而前些天發(fā)出免疫熒光求助貼，回復(fù)的很少，所以有必要加強對免疫熒光方面的討論），不妥之處敬請指正。有人會問酶免疫組化做的好好的，為何要做免疫熒光？其實，這也是我以前思考的難題，現(xiàn)在我認為可能胞膜蛋白含量不高，用普通免疫免疫組化可能做不出來，需要敏感的免疫熒光方法來進行蛋白檢測（我是看許多外文文獻都是這樣做的，因此選擇免疫熒光染色。）抗體
陰性染色產(chǎn)生的原因有：
（1）一抗和二抗?jié)舛炔缓线m或孵育條件不妥。
（2）熒光素提前衰退。熒光素質(zhì)量不佳或操作過程中沒有注意避光等防止熒光素衰退的事項。
（3）血清封閉時間過長。
（4）抗體稀釋液PH值不合適，影響抗原抗體反應(yīng)。
（5）組織切片不平、裂片或脫片很嚴重，易引起大塊陰性著色。
（6）組織標本不新鮮或已經(jīng)冷凍組織制成的切片中抗原易彌散，易引起本來表達的部位陰性染色或弱著色。
（7）熒光顯微鏡不會使用，激發(fā)波長選擇錯誤。
Mouse Lysozyme,LZM ELISA Kit 小鼠溶菌酶 規(guī)格： 48T/96T
Mouse lymphocyte factor ELISA Kit 小鼠淋巴細胞因子 規(guī)格： 48T/96T
Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 小鼠乳酸脫氫酶 規(guī)格： 48T/96T
Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 小鼠角化細胞內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白 規(guī)格： 48T/96T
Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA kit 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6 規(guī)格： 48T/96T
mouse IgM ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgM 規(guī)格： 48T/96T
mouse IgG ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgG 規(guī)格： 48T/96T
mouse IgA ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgA 規(guī)格： 48T/96T
Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白 規(guī)格： 48T/96T
Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit 小鼠D-乳酸脫氫酶 規(guī)格： 48T/96T
抗體Mouse Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type I collagen, I CTP ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 規(guī)格： 48T/96T
Mouse Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit 小鼠CD3分子 規(guī)格： 48T/96T
Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit 小鼠CD19分子 規(guī)格： 48T/96T
Mouse c-jun ELISA Kit 小鼠c-jun 規(guī)格： 48T/96T