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幾種常用的低溫包埋劑
點擊次數(shù)：1209 發(fā)布時間：2015-7-20
Lowicryls：Lowicryls是丙烯酸鹽(acrylate)和甲基丙烯酸鹽(methacrytate)化學(xué)物質(zhì)，包括K4M、K11M、KM23等。其主要特點是在低溫下(K4M：一35℃；K1tM和KM23：-60～-80℃)仍保持低黏度，并具有在紫外光(波長360nm)照射下聚合的能力。這種光聚合作用與溫度無關(guān)，但實驗中為保持包埋劑的低黏稠度，以利于其向組織細胞內(nèi)滲透，要求在低溫下照射。在這些包埋劑中，K4M和K11M具有親水性，能較好地保持組織細胞的微細結(jié)構(gòu)和抗原性，特別適于免疫細胞化學(xué)染色，且背景染色低，是超微結(jié)構(gòu)定位組織細胞抗原的良好包埋劑。KM23為疏水性，圖像反差好，較適于掃描電鏡和透射電鏡的暗視野觀察標本制作。
包埋劑的配制：商品Lowicryls包埋劑由三部分組成，即單體(monomer)、交聯(lián)劑(crosslinker)和引發(fā)劑(initiator)。調(diào)整單體和交聯(lián)劑的比例，可制備軟硬度合適的包埋塊(包埋時多用硅膠囊代替橡膠或塑料制品，后兩者影響紫外線的吸收)。配制比例
K4M 8．65g l7．30g 25．95g 34．6g
交聯(lián)劑 1．35g 2．70g 4．05g 5．4g
引發(fā)劑 0．05g 0．10g 0．15g 0．20g
合計 10．05g 20．10g 30．15g 40．20g
一般可分別用注射器取包埋劑，置于玻璃燒杯內(nèi)，天平稱量，將三者按順序加入后用玻璃棒輕輕攪動3～5分鐘。切忌過分用力攪拌，以防產(chǎn)生氣泡，影響包埋效果。細胞