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有血清培養(yǎng)過(guò)渡到無(wú)血清培養(yǎng)基需要的條件
點(diǎn)擊次數(shù)：1530 發(fā)布時(shí)間：2014-8-13
有血清培養(yǎng)過(guò)渡到無(wú)血清培養(yǎng)基需要的條件
無(wú)血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顧名思義，就是在細(xì)胞培養(yǎng)中不需要添加血清，但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子。無(wú)血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長(zhǎng)因子、必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素等，能減少上述血清帶來(lái)的不利因素，使細(xì)胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是的，從有血清培養(yǎng)過(guò)渡到無(wú)血清培養(yǎng)基的條件并不像想象中那么直截了當(dāng)。處于發(fā)育的不同分化階段的細(xì)胞(例如干細(xì)胞與定向前體細(xì)胞相比)需要不同的配方，對(duì)生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時(shí)，也去除了一些血清蛋白具有的保護(hù)、解毒作用，因此對(duì)試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價(jià)格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。
切記，細(xì)胞培養(yǎng)基的儲(chǔ)存條件是2-8攝氏度。如果細(xì)胞培養(yǎng)基不小心被凍，您應(yīng)該融化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。如果沒(méi)有沉淀產(chǎn)生，培養(yǎng)基可以正常使用，如果出現(xiàn)沉淀，只能丟棄這些培養(yǎng)基。
貯存在冰箱中的瓶口已開(kāi)的培養(yǎng)基，可能在放置幾天后顏色變紫。這主要是由于在暴露到周?chē)腃O2水平時(shí)，碳酸氫納導(dǎo)致了pH值的上升。您可以在使用前松開(kāi)瓶口，在CO2培養(yǎng)箱孵育培養(yǎng)基10-15分鐘，來(lái)校正溶液的pH值(確定松開(kāi)瓶口以保證氣體交換)。
當(dāng)在無(wú)血清培養(yǎng)基中添加抗生素時(shí)，降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的50%。血清蛋白會(huì)結(jié)合和滅活一些抗生素。在無(wú)血清培養(yǎng)條件下，抗生素不被滅活，可能對(duì)于細(xì)胞達(dá)到毒性水平。
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_(kāi)始降解。
總之，大部分添加物和試劑zui多可以凍融3次，如果次數(shù)更多都會(huì)在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀，將會(huì)影響它的性能。
100克 Bile powder of cow 培養(yǎng)基牛膽汁粉 BR，40%
100克 Bile powder of pig 豬膽汁粉 BR
250克 OX Bile dihydrate purified 脫氫牛膽粉 BR
250克 Beef extract powder 小牛浸膏粉 BR
500克 Meat extracts beef 牛肉膏 BR
250克 Yeast extract powder 酵母粉 BR
500克
500克 Yeast extract 酵母浸膏 BR
25克 Bile salt No. 3 3號(hào)膽鹽 BR，90%
25克 Bile salt No. 培養(yǎng)基5 5號(hào)膽鹽 BR，70%
25克 Bile salt No.7 7號(hào)膽鹽 BR
25克 Bile salt from sheep 羊膽鹽 BR
25克 Bile salt from ox 牛膽鹽 BR，60%
1公斤
25克 Bile salt from pig 豬膽鹽 BR，65%
1公斤
25克 Bile salt from poultry 禽膽鹽 BR
250克 Casein acid hydrolysate 酸水解酪蛋白 BR
1公斤
100克 Casamino acid 培養(yǎng)基酪蛋白水解物 BR
500克
250克 Casein Hydrolysate 酶水解酪蛋白 BR
1公斤