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蛋白胨神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)方法
點(diǎn)擊次數(shù)：867 發(fā)布時(shí)間：2014-7-9
蛋白胨神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)方法
蛋白胨神經(jīng)細(xì)胞（神經(jīng)元〕不易培養(yǎng)，只有在適宜情況下，如接種在膠原底層上，或加入神經(jīng)生長(zhǎng)因子和膠質(zhì)細(xì)胞因子時(shí)，可出現(xiàn)一定程度的分化，長(zhǎng)出突起等現(xiàn)象，但很難使之增值。而神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)組織中比較容易培養(yǎng)的成分。
蛋白胨神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)方法如下：
1、從手術(shù)室無(wú)菌取腦髓灰質(zhì)或白質(zhì)后，仔細(xì)剝除腦膜、血管和纖維成分，置Hanks液中漂洗一、二次。
2、置于30—50倍體積的Hanks液中，此時(shí)腦組織比較柔軟，反復(fù)吹打即制成細(xì)胞懸液。
3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后，細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)快自然下沉，脂肪等雜物易漂浮，可吸除上層、反復(fù)二、三次，即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細(xì)胞成分。
4、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液，通過(guò)紗網(wǎng)成紗布過(guò)濾，計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞密度。
5、接入培養(yǎng)瓶或皿中，置5%CO2溫箱中培養(yǎng)。
該細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境過(guò)程較長(zhǎng)，接種后貼壁較慢。貼壁后短期內(nèi)也可能不見(jiàn)細(xì)胞分裂現(xiàn)象，然而一旦生長(zhǎng)后即能迅速進(jìn)入旺盛的增殖狀態(tài)。細(xì)胞傳代可以0.25%胰酶消化處理。