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2014版教您如何使用ELISA試劑盒實驗基礎

點擊次數(shù):1009 發(fā)布時間:2014-5-14

很多人在實驗過程中,難免會遇到各種不同的問題,比如ELISA試劑盒正態(tài)分布及標準差 ,真值 ,質控血清如何使用,實驗的效果不好等等?,F(xiàn)在就由上海研生實業(yè)有限公司為您解答一一解答您的在做實驗過程中遇到的種種疑問!

正態(tài)分布及標準差 
ELISA試驗中,檢驗同一樣本達20次以上時,就會發(fā)現(xiàn)這組數(shù)據(jù)(指測定結果的吸光 
值)分布在均值兩側,大部分集中在均值附近。如果以測定值為橫坐標,以出現(xiàn)的頻率為 
縱坐標作圖,就可繪出一個呈鐘形的曲線圖。如圖5-1,鐘頂處為均值,其他值以均值為 
中心對稱分布,這就是正態(tài)分布。 
換言之,當ELSIA檢測同一樣本達一定次數(shù)后所得的一組數(shù)據(jù),其中靠近均值(X)的 
±1SD范圍內的數(shù)據(jù),占該組數(shù)據(jù)的68%,在X±2SD范圍內分布的數(shù)據(jù)占總體的95%, 
在X±3SD范圍內分布的數(shù)據(jù)占總體的99%。當我們要求檢驗結果在X±2SD范圍內為合格 
時,將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。 
ELISA試劑盒真值 
用確切的、的決定性方法測得的值,稱為真值。真值一般是測不到的。通過可 
靠的決定性方法測出的值,稱為靶值,通常用靶值來表示真值的大小。 
準確度(accuracy) 
是指測定結果與真值(或靶值)接近的程度。準確度不能以數(shù)字表示,往往用不準確 
度來衡量。測定結果與靶值的偏離程度稱為偏差,它表示該項檢驗的不準確度。 
偏差=檢驗的均值-真值(或靶值) 
相對偏差=偏差真值÷(或靶值)×100% 
精密度(Precision) 
是指對同一樣本重復測定時,每次測定結果與平均值的接近程度,即重復測定值之間 
的符合程度。 
標準品 
1、標準品 由WHO或相應組織標定的,用肯定的、*的、準確的物理或化學方法 
測定的定值材料。 
2、生物學活性標準品根據(jù)生物學反應由WHO或相應組織標定的活性單位的材 
料。 
3、參考標準血清 化組織根據(jù)標準化的法定材料??捎糜阼b定儀器和 
鑒定方法準確性。 
 臨床決定性水平(clinical decision leuel) 
當某個被測物的濃度達到某一水平時,臨床醫(yī)師必須采用醫(yī)療措施。被測物的這濃度 
稱為臨床決定性水平。
ELISA試劑盒質控血清的使用 
衛(wèi)生部臨床檢驗中心制備的乙肝標志物質控血清,可以在-20℃保持半年定值不變。 
冰凍狀態(tài)融化使用時,應先混勻,未用完部分可在4℃保存5天。不宜反復冰融或自行分 
裝。開展某項檢驗的室內質控工作需要的質控血清,一般按3-6個月用量準備。自制的不 
定值質控血清,在一批質控血清將用完之前,需準備下一批質控血清。質控血清要求性能 
穩(wěn)定,較長期內效價不變,其理化性質應與病人樣本相近,這樣才能有效地起到監(jiān)測作 
用。 

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