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小鼠纖連蛋白(FN)elisa試劑盒?實驗操作步驟
點擊次數(shù)：1147 發(fā)布時間：2022-2-24
小鼠纖連蛋白(FN)elisa試劑盒實驗操作步驟：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品*終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
phospho-Androgen Receptor (Ser213)磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser650)磷酸化雄激素受體抗體
phospho-AKT1+2+3 (Tyr315+316+312) 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體
phospho-AKT1(Thr34)磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-ATF2(Ser472)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
3-Apr凋亡相關(guān)蛋白3抗體
ATG18自噬相關(guān)蛋白18抗體
ATG4A自噬相關(guān)蛋白4A抗體
APOA4載脂蛋白A4抗體
ALOX1212脂氧合酶抗體
Angiotensin III血管緊張素III抗體
ADCY3腺苷酸環(huán)化酶3抗體
Angiomotin血管動蛋白抗體
Adenovirus 5 E1A腺病毒早期E1A蛋白抗體
phospho-ATF2 (Ser44)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2 (Ser94)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATXN1(Thr236)磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體
ANKRD17錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體
ALDH1A1胞質(zhì)乙醛脫氫酶1抗體
ARL3ADP核糖基化樣因子ARL3抗體
15 Lipoxygenase 1花生四烯酸15脂氧合酶1抗體
ABC2乳腺癌增強蛋白2抗體
Alpha 1 microglobulinα1微球蛋白抗體