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小鼠肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)事項(xiàng)

點(diǎn)擊次數(shù):1785 發(fā)布時(shí)間:2021-6-17

小鼠肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)事項(xiàng):

1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2.   加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.   洗滌:洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
   SMMC7721/DDP人肝癌順鉑耐藥株
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K562/ADR人白血病阿霉素耐藥株
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MCF7/Taxol人乳腺癌紫杉醇耐藥株
SMMC-7721/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株
Huh-7/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株
A549/吉非替尼耐藥株人肺癌吉非替尼耐藥株
SGC7901/V人胃癌長(zhǎng)春新堿耐藥
A2780/V人卵巢癌長(zhǎng)春新堿耐藥株
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HL-60/Adr人白血病阿霉素耐藥株
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A2780/Adr人卵巢癌阿霉素耐藥株
HO-8910/ADR人卵巢癌阿霉素耐藥株
lovo/Adr人結(jié)腸癌阿霉素耐藥株
MCF7/Adr人乳腺癌阿霉素耐藥株
BEL/Adr人肝癌阿霉素耐藥株
SGC7901/Adr人胃癌阿霉素耐藥株
BIU-87/Adr人膀胱癌阿霉素耐藥株
A549/Adr人肺癌阿霉素耐藥株
HL-60/Taxol人白血病紫杉醇耐藥株
K562/Taxol人白血病紫杉醇耐藥株
A2780/Taxol 人卵巢癌紫杉醇耐藥株
HO-8910/Taxol人卵巢癌紫杉醇耐藥株
HCT8/Taxol人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株
A549/Taxol 人肺癌紫杉醇耐藥株
hct116/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株

 

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