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孔雀石綠檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)液方法
點擊次數(shù)：1359 發(fā)布時間：2021-3-11
孔雀石綠檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)液：
標(biāo)準(zhǔn)品溶液（0ppb，0.05ppb，0.1ppb，0.2ppb，0.4ppb，0.8ppb）
取6個1.5ml離心管，把標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液稀釋10倍（如：450ul標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加入50ul10×標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液）
6.1編號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
6.2活化：加120ul活化劑工作液（配液B）到微孔中，室溫下反應(yīng)10min，倒掉拍干，加洗滌工作液（配液A）250ul/孔，洗滌5次，每次間隔30s，棄去孔中液體，在吸水紙上拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的吸頭戳破）。
6.3加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中，然后加抗體工作液50µl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，37℃避光反應(yīng)30分鐘。
6.4洗滌：將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液工作液250µl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，后用吸水紙拍干。
6.5加酶反應(yīng)：加酶標(biāo)記物100µl/孔，37℃避光反應(yīng)30分鐘。
6.6洗滌：同上
6.7顯色：加底物液A50µl/孔，再加底物液B50µl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，37℃避光顯色15分鐘。
6.8終止：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng)。
6.9測吸光值：用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。