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小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白競(jìng)爭(zhēng)法的簡(jiǎn)要操作步驟
點(diǎn)擊次數(shù)：1288 發(fā)布時(shí)間：2020-7-15
小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白簡(jiǎn)化的程序列表如下：
1、將一級(jí)抗體（未標(biāo)記）與樣品抗原一起孵育。
2、將抗體、抗原復(fù)合物添加到預(yù)先用相同抗原包被的96孔板中。
3、 通過洗滌板除去未結(jié)合的抗體。（樣品中的抗原越多，與孔中的抗原結(jié)合的抗體越少，因此稱為“競(jìng)爭(zhēng)”。）
4、添加對(duì)一抗具有特異性并與酶偶聯(lián)的二抗。小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白(AFP-L2) ELISA kit生物研究中心
5、添加底物，剩余的酶引發(fā)發(fā)色或熒光信號(hào)。
6、對(duì)于競(jìng)爭(zhēng)性ELISA，樣品抗原濃度越高，終信號(hào)越弱。
競(jìng)爭(zhēng)性ELISA的主要事件是由原始抗原（樣品抗原）和添加抗原執(zhí)行的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合過程。與間接ELISA，三明治式ELISA和直接ELISA相比，競(jìng)爭(zhēng)性ELISA的程序在某些方面有所不同。競(jìng)爭(zhēng)法的簡(jiǎn)要操作步驟：
1）先加入特異性抗原，使抗原固定結(jié)合于載體表面；
2）加入梯度濃度比例的待測(cè)樣品與酶標(biāo)抗體混合物，并做只加酶標(biāo)抗體的對(duì)照組；
3）加入酶促反應(yīng)底物，發(fā)生顯色反應(yīng)，對(duì)比實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組的顯色差異，計(jì)算未知抗體的量。