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技術(shù)文章
豬源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒反應(yīng)準備
點擊次數(shù)：1522 發(fā)布時間：2020-4-14
豬源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒使用支原體污染PCR檢測試劑盒，能在2到3小時內(nèi)獲得可靠的結(jié)果，是一種靈敏度高、特異性強、快速的檢測支原體污染的方法，具有以下特點： ①特異性引物是針對高度保守的支原體16S rRNA序列設(shè)計的，可用于檢測非常廣泛的支原體種類，不受真核細胞或細菌DNA干擾。經(jīng)本試劑盒測試的支原體菌株涵蓋了所有常見的支原體污染種類； ②靈敏度*，低僅需10個拷貝的支原體基因組即可使檢測呈陽性； ③陽性對照所用引物與支原體檢測相同，可幫助判斷假陰性現(xiàn)象，避免假陰性導(dǎo)致的誤判； ④包含PCR反應(yīng)所需的所有成分，只需進行一次PCR反應(yīng)。
PCR反應(yīng)的準備：
待各組份融化后先瞬時離心，然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系，每次實驗需加一個陰性和一個陽性對照，測試反應(yīng)管可以有多個。配制過程中應(yīng)注意無菌，戴口罩，并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染，推薦在有風壓的設(shè)備如超凈臺或生物安全柜中進行操作。建議配制完畢后瞬時離心以使液體沉至管底。