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ELISA試劑盒標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素
點(diǎn)擊次數(shù)：1087 發(fā)布時(shí)間：2017-7-11
ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素：
（1）ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠嚴(yán)重溶血，以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性，催化底物顯色造成假陽(yáng)性；
（2）混有紅細(xì)胞的血清 易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈；
（3）如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)；
（4）標(biāo)本凝固不全，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè)，常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA 測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊，易造成假陽(yáng)性結(jié)果；
（5）采血試管洗滌不*、ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠反復(fù)使用易交叉污染；
（6）塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ，樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。
ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1）目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于（競(jìng)爭(zhēng)法則淺于）陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2）以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3）以P／N值（陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值）大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4）ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。