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液相色谱柱有哪些要求?

阅读:3309      发布时间:2017-5-23
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填充剂的要求
  zui常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂,以十八烷基硅烷键合硅胶zui为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等)也有使用。正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。离子交换色谱系统使用离子交换填充剂;分子排阻色谱系统使用凝胶或高分子多孔微球等填充剂;对映异构体的分离通常使用手性填充剂。 
  填充剂的性能(如载体的形状、粒径、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、含碳量和键合类型等)以及色谱柱的填充,直接影响供试品的保留行为和分离效果??拙对?5nm(1nm=10Å)以下的填料适合于分析分子量小于2000 的化合物,分子量大于2000 的化合物则应选择孔径在30nm 以上的填料。除另有规定外,分析柱的填充剂粒径一般在3μm~10μm 之间。粒径更?。ㄔ?μm)的填充剂常用于填装微径柱(内径约2mm),使用微径柱时,输液泵的性能、进样体积、检测池体积和系统的死体积等必须与之匹配;如有必要,色谱条件也需作适当的调整。当对其测定结果产生争议时,应以品种正文规定的色谱条件的测定结果为准。
 
温度的要求
  以硅胶为载体的普通键合固定相的使用温度通常不超过35℃,为改善分离效果可适当提高色谱柱的使用温度,但不能超过60℃。
 
流动相的要求
  流动相的pH 值应控制在2~8 之间。当pH 值大于8 时,可使载体硅胶溶解;当pH 值小于2 时,与硅胶相连的化学键合相易水解脱落。当色谱系统中需使用pH 值大于8 的流动相时,应选用耐碱的填充剂,如采用高纯硅胶为载体并具有高表面覆盖度的键合硅胶填充剂、包覆聚合物填充剂、有机-无机杂化填充剂或非硅胶填充剂等;当需使用pH 值小于2 的流动相时,应选用耐酸的填充剂,如具有大体积侧链能产生空间位阻?;ぷ饔玫亩毂蚨於』〈送榛柰榧瞎杞禾畛浼?,或有机-无机杂化填充剂等。

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