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1.1實(shí)驗(yàn)儀器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色譜儀；

色譜柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01230-02）；

純水機(jī)：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；

SHIMSEN Disc HPPTFE針式過濾器（P/N：380-00341）；

LC-MS認(rèn)證樣品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

Nichipet Air移液槍：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；

Nichipet Air 10-100 μL（P/N：00-NAR-100）；

Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；

Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-10000）。

1.2   混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備

分別精密稱取咖fei因、兒茶素（dl-C）、表兒茶素（EC）、沒食子兒茶素沒食子酸酯（GCG）、表沒食子兒茶素（EGC）、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）和表兒茶素沒食子酸酯（ECG）標(biāo)準(zhǔn)品適量，加50%甲醇溶解并稀釋制成每l mL中各含100 μg的溶液，作為高濃度混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液；取高濃度混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液適量，用50%甲醇稀釋制成每1 mL中各約含0.5 μg的溶液，作為低濃度混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.3   分析條件

色譜柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01230-02）

柱溫：40℃

檢測波長：210 nm

流速：1.1 mL/min

進(jìn)樣量：10 μL

流動相：A：0.1%磷酸水溶液

B：0.1%磷酸甲醇溶液

梯度洗脫程序如下：

按照上述色譜條件（1.3）進(jìn)行采集，混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液色譜圖如下：

高濃度混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（100 μg/mL）

低濃度混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（0.5 μg/mL）

重復(fù)性

低濃度混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（0.5 μg/mL）重復(fù)性