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目录:北京索莱宝科技有限公司>>生化检测试剂盒-常量法>>其它系列>> BC4180-50T/48S莽草酸脱氢酶活性检测试剂盒 其它系列

莽草酸脱氢酶活性检测试剂盒 其它系列
  • 莽草酸脱氢酶活性检测试剂盒 其它系列
参考价 面议
具体成交价以合同协议为准
参考价 面议
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  • 品牌 SOLARBIO/索莱宝
  • 型号 BC4180-50T/48S
  • 厂商性质 生产商
  • 产品资料 查看pdf文档
  • 所在地 北京市
属性

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更新时间:2024-04-12 15:01:14浏览次数:726评价

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CAS 详询 纯度 详询
分子量 详询 分子式 详询
供货周期 现货 规格 50T/48S
货号 BC4180 应用领域 环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合
主要用途 莽草酸脱氢酶(SD)活性检测
储存条件
-20℃
中文名称
莽草酸脱氢酶活性检测试剂盒 其它系列
有效期
6个月
单位

英文名称
Shikimic acid Dehydrogenase(SD) Activity Assay Kit
检测方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
规格
50T/48S


莽草酸脱氢酶(SD活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号: BC4180
规格: 50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件
提取液液体60 mL×1瓶2-8℃保存
试剂一液体20 mL×1瓶2-8℃保存
试剂二粉剂×12-8℃保存
试剂三粉剂×2-20保存
溶液的配制:
  1. 提取液:内含不溶物,用前摇匀。

  2. 试剂二:临用前加入10 mL蒸馏水溶解。

  3. 试剂临用前每瓶加入11 mL蒸馏水溶解。

  4. 工作液的配制:根据用量按照试剂一:试剂二:试剂三为7:4:8的体积比例充分混匀,现用现配,用前25℃预热15min。

产品说明:
莽草酸途径是存在于植物和微生物中的一条重要的代谢途径,莽草酸脱氢酶(EC 1.1.1.25) 是莽草酸合成代谢途径中催化第四步反应的关键酶。
莽草酸脱氢酶催化莽草酸和NADP产生NADPH,检测340nm下的吸光值增加速率来表示SD活性。
Shikimic Acid +NADP               NADPH(340nm)
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
自备的仪器和用品
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献
1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液(加入前摇匀))进行冰浴匀浆,然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
2、细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
3、液体:直接检测。
二、测定步骤具体操作步骤详见“产品资料"附件
  1. 紫外分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

  2. 工作液25℃预热10min以上。

  3. 操作表:在1mL石英比色皿中分别加入下列试剂

试剂名称空白管测定管
工作液(µL)950950
样本(µL)-50
蒸馏水(µL)50-
加入样本即开始计时,充分混匀后于340nm处测定20s时的吸光值A15min20s时的吸光值A2,计算ΔA测定管=A2测定-A1测定,ΔA空白管=A2空白-A1空白,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管(空白管只需做1-2次)。

注意事项
  1. 样本提取上清液置于冰上待测,且样本提取完成后建议2h内测完。

  2. 样本的蛋白浓度需自行测定,由于提取液中含有一定浓度的蛋白(约1mg/mL),所以测定样本蛋白浓度时需扣除提取液自身蛋白浓度。

  3. ΔA大于1时,建议将样本稀释后再进行测定。ΔA小于0.01时,可以延长反应时间(10min15min)来测定。

  4. 空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,变化不超过0.01

实验实例:
  1. 0.1g萝卜叶,加入1mL提取液,进行样本处理,取上清按照测得步骤操作,测得计算ΔA测定管=A2测定-A1测定=1.441-1.201=0.24,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.24,按照样本质量计算得:SD酶活(U/g 质量)=643×ΔA÷W=1543.2 U/g 质量。

相关系列产品:

BC2030/BC2035 异柠檬酸裂解酶(ICL)活性检测检测试剂盒
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