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目录:北京索莱宝科技有限公司>>生化检测试剂盒-微量法>>微量法生化试剂盒>> BC2575-100T/48Sα-半乳糖苷酶活性检测试剂盒 微量法

α-半乳糖苷酶活性检测试剂盒 微量法
  • α-半乳糖苷酶活性检测试剂盒 微量法
参考价 面议
具体成交价以合同协议为准
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具体成交价以合同协议为准
  • 品牌 SOLARBIO/索莱宝
  • 型号 BC2575-100T/48S
  • 厂商性质 生产商
  • 产品资料 查看pdf文档
  • 所在地 北京市
属性

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更新时间:2024-04-11 11:13:59浏览次数:688评价

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CAS 详询 纯度 详询
分子量 详询 分子式 详询
供货周期 现货 规格 100T/48S
货号 BC2575 应用领域 环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合
主要用途 测定意义:α-GAL (EC 3.2.1.22)广泛存在于动物、植物、微生物和培
储存条件
-20℃
中文名称
α-半乳糖苷酶活性检测试剂盒 微量法
有效期
6个月
单位

英文名称
α-galactosidase(α-GAL) Activity Assay Kit
别名
α-半乳糖苷酶试剂盒 α-GAL Kit α-半乳糖苷酶(α-GAL)试剂盒 α-半乳糖苷酶(α-GAL)测试盒
检测方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reade


α-半乳糖苷酶(α-GAL)活性检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC2575
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件
提取液液体100 mL×1瓶2-8℃保存
试剂一粉剂×2-20℃保存
试剂二液体4 mL×1瓶2-8℃保存
试剂三液体15 mL×1瓶2-8℃保存
标准品液体1 mL×1支2-8℃保存
溶液的配制:
1、试剂一:临用前取1支加入1.25 mL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融(1瓶粉剂溶解后可做100T,为了延长使用时间,此产品多给1瓶粉剂);
2、标准品:5 μmol/mL的对硝基 苯*溶液。
产品说明:
α-GAL (EC 3.2.1.22)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能专一地催化α-半乳糖苷键的水解,主要参与棉子糖、水苏糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL对于植物种子的萌发至关重要,种子萌发初期,其催化产生的D-半乳糖通过糖酵解途径迅速转化和消耗,为种子的萌发提供最初的能量来源,后期则主要参与细胞壁储藏多糖水解。
α-GAL分解对-硝基 苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基 苯*,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算α-GAL活性。

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、超声破碎仪、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、细菌或培养细胞的处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率200W,超声3s,间隔10s,重复30次),15000g,4℃,离心20min,取上清,置冰上待测。
2组织的处理:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆;15000g,4℃,离心20min,取上清,置冰上待测。
 
  • 测定步骤

  1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至400nm,分光光度计蒸馏水调零。

  2. 标准液的稀释:将标准液用蒸馏水稀释至200、100、50、25、12.5、6.25、0nmol/mL标准溶液待测

  3. 标准液稀释可参考下表:

序号稀释前浓度(nmol/mL)标准液体积(µL)蒸馏水体积(µL)稀释后浓度(nmol/mL)
15000801920200
220010001000100
31001000100050
4501000100025
5251000100012.5
612.5100010006.25
76.25010000(空白管)
备注:实验中每个标准管需70µL标准溶液。
  1. 样本测定(在EP管或96孔板中依次加入下列试剂):

试剂名称(μL测定管对照管标准管
试剂一25--
蒸馏水-25-
试剂二3535-
样本 1010-
迅速混匀,放入37℃水浴锅/恒温培养箱中准确反应30min
标准品--70
试剂三130130130
充分混匀,室温静置2min后,于400nm处测定吸光值A,分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管。计算ΔA测定=A测定管-A对照管,ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管需设一个对照管。标准曲线和空白管只需测1-2

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