紫外可見分光光度計是分析化學(xué)中的重要工具，其使用細節(jié)直接影響數(shù)據(jù)的準確性和儀器壽命。以下從使用前準備、校準與測量操作、環(huán)境控制、日常維護等方面展開，闡述其關(guān)鍵細節(jié)。
一、使用前準備
1. 儀器預(yù)熱與自檢：
- 開機前需確保電源接地良好，并檢查樣品室是否存在遺留的防潮劑或雜物。
- 預(yù)熱時間因型號而異，一般為15-30分鐘，以確保光源穩(wěn)定和儀器自檢完成。
2. 環(huán)境條件控制：
- 溫度：建議保持在5-35℃，避免儀器內(nèi)部過熱加速元件老化。
- 濕度：需低于85%，高濕度易導(dǎo)致光學(xué)部件發(fā)霉、金屬部件銹蝕。
- 防塵與腐蝕氣體：避免實驗室環(huán)境中存在腐蝕性氣體或過多塵埃，定期清潔儀器表面及樣品室。
二、校準與測量操作
1. 波長校準與零點校正：
- 使用空白溶液(如溶劑或參比液)進行零點校準，確保吸光度歸零(0.000A)或透光率滿度(100%T)。
- 手動設(shè)置波長時需匹配樣品的吸收峰，避免波長漂移導(dǎo)致誤差。
2. 測量操作步驟：
- 裝入比色皿：選擇石英材質(zhì)用于紫外區(qū)(190-400nm)，玻璃或塑料材質(zhì)適用于可見光區(qū)。
- 空白校正：將參比溶液推入光路，按“AUTO-ZERO”或“100%T”鍵，直至顯示100%T或0.000A。
- 樣品測試：更換待測樣品，記錄吸光度或透光率值，需確保比色皿外壁無液滴殘留。
三、樣品與比色皿處理
1. 比色皿選擇與清潔：
- 紫外區(qū)需用石英比色皿，可見區(qū)可選用玻璃或塑料材質(zhì)。
- 測量前后需用蒸餾水沖洗比色皿，若有殘留可用無水乙醇浸泡，禁用粗糙紙張擦拭以免劃傷。
2. 樣品制備：
- 吸光度應(yīng)控制在0.1-1.0范圍內(nèi)，濃度過高可能導(dǎo)致光源飽和，過低則信號弱。
- 避免樣品與比色皿內(nèi)壁接觸，必要時用移液器精確稀釋。
四、環(huán)境干擾與維護
1. 減少振動與溫度波動：
- 儀器需放置于平穩(wěn)臺面，避免震動導(dǎo)致燈絲斷裂或光路偏移。
- 內(nèi)置溫控系統(tǒng)的儀器仍需注意環(huán)境溫度變化，建議實驗室配置恒溫設(shè)備。
2. 定期維護與故障處理：
- 清潔光學(xué)系統(tǒng)：定期用擦鏡紙清潔透鏡，檢查光路是否偏移，必要時由工程師校準。
- 更換光源：氘燈(紫外區(qū))和鎢燈(可見區(qū))需按廠商建議周期更換，避免亮度衰減影響數(shù)據(jù)。
- 除濕處理：若儀器受潮，可用電吹風(fēng)低溫干燥光電管暗盒，并更換干燥劑。
五、常見問題與應(yīng)對
1. 透光率無法調(diào)至100%：檢查光源是否老化或波長校準偏差，需重新調(diào)整或更換燈泡。
2. 測量重復(fù)性差：可能因環(huán)境溫度波動、比色皿污染或儀器未充分預(yù)熱，需逐一排查。
3. 光路堵塞：若樣品室漏液導(dǎo)致光學(xué)部件污染，需拆卸清潔并干燥處理。
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