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構建手足口病相關病毒的感染性克隆
閱讀：520 發(fā)布時間：2012-3-24近日，學術刊物Virology Journal發(fā)表了中國科學院上海巴斯德研究所關于構建手足口病相關的柯薩奇病毒A16型（coxsackievirus A16，CVA16）感染性克隆的研究成果。
手足口病是5歲以下兒童中發(fā)生的常見傳染病，僅2010年和2011年，全國共有3,394,375例感染，其中死亡1414例，對于兒童的健康成長造成嚴重威脅，但目前尚無針對手足口病的預防性疫苗或治療性藥物。
CVA16和人腸道病毒71型（enterovirus 71，EV71）是引起手足口病的主要病原體，因此，了解CVA16和EV71基因組中各個區(qū)域的功能，對加強CVA16和EV71的病毒學和免疫學研究，盡快研制出有效的預防和治療方法，保障中國兒童的生命健康有非常重要的意義。然而，EV71和CVA16均屬于RNA病毒，直接對它們的基因組進行遺傳操作非常困難。
上海巴斯德所研究生劉菲、劉慶偉、蔡一村等在黃忠研究員指導下，通過分子生物學手段，提取了CVA16病毒的基因組RNA，并且進行體外反轉錄操作獲得與病毒基因組相對應的cDNA序列，將此序列構建到一個表達載體中，獲得攜帶感染性cDNA克隆的質粒。利用該質粒可以包裝出具有感染性的拯救病毒。通過觀察細胞病變、蛋白質印跡以及免疫熒光等方法證實，拯救病毒與野生病毒的功能*一致。同時，測序結果還表明，拯救病毒的基因組具有穩(wěn)定的遺傳性。
利用新構建出的感染性克隆，科研人員可以很方便地對RNA病毒的基因組進行體外操作，從而對病毒的結構、功能等多方面進行研究。更長遠地來說，CVA16感染性克隆為今后闡明病毒的致病性，開發(fā)針對EV71/CVA16的預防性疫苗和治療性藥物等提供了研究基礎。
該研究得到中國科學院“百人計劃”、生化工程國家重點實驗室開放基金及賽諾菲-安萬特-中科院上海生命科學研究院青年人才基金的資助。