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一、实验原理

微生物个体微小、代谢旺盛、生长繁殖快，如果保存不妥容易发生变异和杂菌污染，甚至导致细胞死亡等现象。因此，保存好菌种是非常必要和重要的。常用的菌种保藏方法包括传代培养法、载体法、悬液法、冷冻法和真空干燥法

二、试剂与器材

1、材料 大肠杆菌、青霉菌、放线菌

2、试剂 液体石蜡、甘油、五氧化二磷、95％乙醇、10％盐酸、无水氯化钙、食盐、干冰

3、器材 无菌吸管、无菌滴管、无菌培养皿；安额管、冻干管、40目与100目筛子、油纸、滤纸条（0.5X1、2cm）、干燥器、真泵器、真空泵、真空压力表、喷灯、L形五通管、冰箱、低温冰箱（—30℃）、超低温冰箱和液氮罐等。

三、实验内容

1、斜面保藏法

2、液体石蜡法

3、穿刺保藏法

4、砂土管保藏法

5、冷冻真空干燥保存法

四、关键步骤及注意事项

1、清楚各种保藏方法的优缺点，针对不同要求选择适宜的保藏方法。

2、熔封安瓶时防止封闭不严。

3、液氮冻存操作应防止冻伤。