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IFN-γ诱生法检测IL—12
阅读:426 发布时间:2012-4-21其原理为IL-12能激活外周血淋巴细胞(PBL)产生IFN-γ,在一定范围内诱生的IFN-γ量与IL-12的量呈剂量相关性。
1.在96孔培养板中每孔加i00~L106个PBL细胞。
2.将待测样本系列稀释,分别加入各孔,lOOtuL/孔,并用不同稀释度的I[,-12标准晶作对照。
3.培养18h后,取上清100~tL,测IFN-~活性(方法见本章第三节)。IL-12的活性单位定义为:能诱导IFN-7zui大产率50%的IL-12量称为1个IL-12活性单位。
尚有LAK杀伤活性法,其原理是IL-12和IL-2能协同诱导PBL的LAK活性,在IL-2剂量固定时,I_AK细胞活性与IL-12含量相关。然后用51Cr释放法测LAK活性,与标准品对照可测出样本Il,-12活性。