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当蛋白质的zui适稳定量及标记的*pH值被确定以后，便可进行标记。具体步骤如下。

（1）根据标记所用胶体金的总量计算出所需要待标记蛋白质的总量。

（2）边搅拌边将蛋白质溶液加入胶体金溶液中，逐渐加入，lmg的蛋白质量大约需5min，或在搅拌下将胶体金逐渐加入到蛋白质溶液中，大约需5～10min。

（3）继续搅拌10min，然后加入5％BSA使其终浓度为1％，或加入3％聚乙二醇（PEG，Mr：20000）使其终浓度为0．05％，其效果BSA要优于PEG。

（4）将标记好的胶体金装入透析袋中，两头扎紧，放人蔗糖或硅胶中浓缩，浓缩到原体积的1/10量，浓缩完毕后纯化。如用离心纯化方法时，不需要浓缩。