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美國InBios RK-39黑熱病檢測試劑盒的應用

【產品名稱】

通用名稱：犬黑熱病快速檢測條

英文名稱：Kalazar Detect™ Canine Rapid Test

黑熱病檢測試劑盒

【產品規(guī)格】

25T

【預期用途】

檢測條可用于犬內臟利什曼原蟲（VL）抗體的定性檢測。

【檢測原理】

該檢測條的硝化纖維膜在檢測區(qū)包被了重組的VL抗原，在質控區(qū)包被了雞抗蛋白A。在實驗中，血清樣本與膠體金結合物（膠體金標記的蛋白A）反應，而膠體金結合物預先包被在檢測條上?；旌衔镌诿毠茏饔孟卵刂趸w維膜移動，然后與重組的VL抗原反應，并生成一條紅色帶。如果存在該紅色帶表明陽性結果，反之則為陰性結果。

【試劑盒組成成分】

• 檢測條        25份

• Chase緩沖液一瓶

【儲存條件】

檢測條應保存在20~30℃（室溫）直至有效期。Chase緩沖液也應保存在20~30℃。暴露在超過30℃溫度下（多5天）會影響檢測性能，所以應盡量避免。檢測條不應冷凍保存，并且從密封袋中取出后應在0.5小時內使用，避免受濕度影響。

【樣本要求】

• 該實驗中應使用犬血清，不能使用全血樣本。不能對樣本進行稀釋，

• 凝血后盡快離心分離血清，以避免溶血現象的產生。

• 應在采集血清后盡快進行實驗。血清不能長時間存放在室溫下。血清于2~8℃可保存3天，更長時間則應保存在-20℃以下。

• 實驗前血清平衡至室溫。冷凍的血清必須充分融解。避免反復凍融。

• 如果血清需要運輸，其包裝應該符合聯邦的傳染源運輸法規(guī)。

【檢測步驟】

• 實驗前讓血清平衡至室溫

• 從密封袋或瓶中取出檢測條

• 在檢測條箭頭下方加樣區(qū)加入20ul的血清

• 在小試管中，或者96孔的組織培養(yǎng)板的微孔中加入2-3滴（150ul）的Chase緩沖液

將檢測條插入小試管或者微孔中，根據檢測條上的箭頭，其末端應該朝下

• 在10分鐘內讀取結果。在讀取結果前，背景的清晰度是十分重要的。尤其是當樣本含低滴度的抗利什曼原蟲抗體時，就只有一條很弱的色帶出現在實驗區(qū)（T）。10分鐘后讀取可能會導致錯誤結果

注意：不要只是加入Chase緩沖液進行實驗。必須首先加入20ul的血清。

如果在加入捕獲緩沖液后的10-15秒并沒有觀察到膠體金的移動，可輕輕壓檢測條上的樣本加入區(qū)，直到觀察到膠體金的移動。

【結果解釋】

陽性結果

實驗陽性則質控帶（C）和實驗帶（T）均出現。一條微弱的色帶也為陽性結果。作為解釋指南，實驗區(qū)的紅色帶的顏色強度與抗利什曼原蟲抗體濃度相關。實驗帶為“弱陽性"血清樣本，實驗結果可能為弱陽性但可分辨的紅色帶，（“弱陽性"樣本則含有對重組抗原低親和力或者低滴度抗體）。

陰性結果

實驗為陰性，則只有質控帶出現。沒有出現實驗帶

無效結果

質控帶和檢測帶都沒有出現結果，若只有檢測帶出現紅色線，而質控帶沒有出現，則也為無效結果

建議使用新的檢測條和新血清再次進行實驗。

注意：實驗區(qū)的紅色帶的變化是依賴于抗利什曼原蟲抗體濃度。然而，該實驗不能檢測抗體的定量值和增加的百分比。

【期望值】

使用該檢測試劑在26條確認患有利氏曼病 的犬上進行測試，26條犬全部檢出（檢出率100%）8條非感染的犬的檢測顯示，陽性率為0。

【注意事項】

• 僅用于體外診斷

• 本測試只表明有利氏曼抗體存在，并不是診斷該病的標準。

• 如果檢測結果為陰性，而臨床癥狀存在，建議采用其他臨床方法進行進一步測試，陰性的結果并不排除利氏曼的感染。

• 不要使用含有甘油或其他粘稠材料的 血清或血將，會影響實驗的靈敏度。

• 不要使用過期產品。

• 處理使用的所有血清和試劑盒，如同含有感染因子一樣。在執(zhí)行所有程序時，應遵守已確定的微生物危害預防措施，并按照正確處理血清和試劑盒的標準程序進行。

• 執(zhí)行測定時，穿上，防護眼鏡和一次性手套。檢測完成后*洗手。

• 在測試期間避免手和眼睛或粘膜之間的所有接觸。

• 處理血清和藥劑的區(qū)域不要進食，喝酒或吸煙。

• Chase Buffer含有防腐劑; 避免所有可能的接觸皮膚和粘膜。

利士曼檢測試劑盒產品信息