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德國IBL品牌的（Melatonin）褪黑激素試劑盒可用于人血清和血漿中褪黑激素的體外定量檢測。褪黑激素試劑使用的是ELISA方法檢測，僅用于科研使用。

褪黑激素試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

通用名稱：褪黑激素檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名稱：Melatonin ELISA

產(chǎn)品規(guī)格：96T

預(yù)期用途：

褪黑激素試劑盒可用于人血清和血漿中褪黑激素的體外定量檢測。僅用于科研使用。

檢測原理：

利用的是競爭法的原理。生物素和非生物素標(biāo)記的抗原競爭性結(jié)合包被板上有限的抗體結(jié)合位點。生物素抗原結(jié)合到抗體上的量與樣品中抗原的量成反比。系統(tǒng)達(dá)到平衡后，洗板除去游離的生物素抗原，結(jié)合到抗體上的生物素抗原可以用抗生物素堿性磷酸酶標(biāo)記物和對硝基苯磷酸底物檢測出來。用已知的標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，將未知樣品的酶活性與標(biāo)準(zhǔn)曲線進行比較就可以定量出未知樣品的量。

組成成分：

數(shù)量	標(biāo)記	成分
1×12×8	MTP	微孔板，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克隆）。
3×2ml	BIOTIN LYO	褪黑激素生物素，凍干，內(nèi)含穩(wěn)定劑。
3×2ml	ANTISERUM LYO	褪黑激素抗血清，凍干粉，內(nèi)含抗血清（兔，多克?。┖头€(wěn)定劑。
1×250ul	ENZCONJ CONC	酶聯(lián)物，80倍濃縮，內(nèi)含堿性磷酸酶標(biāo)記的抗生物素抗體（羊）、Tris緩沖液和穩(wěn)定劑。
1×6×2ml	CAL A-F LYO	標(biāo)準(zhǔn)品A-F，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，提取濃度請見試劑瓶標(biāo)簽或QC質(zhì)控品。
1×2×2ml	CONTROL 1+2 LYO	質(zhì)控品1+2，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，濃度/可接受范圍請見試劑瓶標(biāo)簽。
1×100ml	WASHBUF CONC	洗滌液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液
32×13ml	PNPP SUBS	PNPP 即用
1×15ml	PNPP STOP	PNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。
2×10	EXTRCOL	提取柱，即用，C18 RP，1cm3/100mg。另需提取柱可從IBL定購（編號：KEME761）
3×	FOIL	封板紙

所需材料（未提供）

1）移液器，體積：50; 500ul

2）試管（12×75mm）

3）軌道振蕩器（400-600rpm）

4）旋渦混合器

5）帶儲器的8道移液器

6）洗滌瓶，自動或半自動洗板機

7）離心機（冷凍離心機更適宜）：100-200×g，也可選用多頭抽真空裝置（例如：Mallinekrodt-Baker 或Waters）。

8）甲醇（HPLC級）

9）蒸發(fā)離心機

10）可在405nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀（參考波長600-650nm）

11）蒸餾水或去離子水

12）吸水紙、取樣吸頭和計時器

儲存條件：

必須在2-8℃的環(huán)境下運輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述,如果將包被板密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下時,試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它樣品的提取或儲存于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復(fù)使用4次。

樣本要求：

血清，血漿（EDTA，肝素）

按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項采集樣品，血液樣品自采集到實驗時都必須保證其化學(xué)完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?；鞚岬臉悠窇?yīng)當(dāng)在實驗開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。
儲存	2-8℃	≤-20℃	≤-70℃	避免太陽直射，避免反復(fù)凍融。
穩(wěn)定性	24小時	3個月	1年	避免太陽直射，避免反復(fù)凍融。

檢測方法：

注意	用于96人份檢測色試劑盒成分可分成3次進行。下列所述體積為檢測32人份時所需要的量。

凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備：

稀釋/溶解	成分		稀釋劑	比例	備注	儲存	穩(wěn)定性
15ml	洗滌液	150ml	雙蒸水	1：10		2-8℃	8周
	標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品	2.0ml	雙蒸水		靜置15min，混合時避免氣泡	≤-20℃	直至有效期
	褪黑激素生物素	2.0ml	已稀釋的洗滌液		靜置15min，混合時避免氣泡	臨時配置,只能使用一次
	褪黑激素抗血清	2.0ml	蒸餾水		靜置15min，混合時避免氣泡
70ul	酶聯(lián)物	5.6ml	已稀釋的洗滌液	1:81
10ml	未稀釋甲醇	100ml	蒸餾水	10%(v/v)

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