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酶聯(lián)診斷試劑常用的兩大洗滌方式介紹

時間:2018/9/11閱讀:1711
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   酶聯(lián)診斷試劑常用的兩大洗滌方式介紹
  酶聯(lián)診斷試劑是酶免疫測定技術中應用較廣的技術。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應板 ) 表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。
  酶聯(lián)診斷試劑具有快速、敏感、簡便、易于標準化等優(yōu)點,使其得到迅速的發(fā)展和廣泛應用 。盡管早期的試劑盒由于特異性不夠高而妨礙了其在實際中應用的步伐,但隨著方法的不斷改進、材料的不斷更新,尤其是采用基因工程方法制備包被抗原,采用針對某一抗原表位的單克隆抗體進行阻斷酶聯(lián)診斷試劑試驗,都大大提高了酶聯(lián)診斷試劑的特異性,加之電腦化程度*的檢測儀的使用,使酶聯(lián)診斷試劑更為簡便實用和標準化,從而使其成為廣泛應用的檢測方法之一。
  酶聯(lián)診斷試劑靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。對于酶聯(lián)診斷試劑的洗滌主要有兩大方法,那今天酶聯(lián)診斷試劑廠家就給大家簡單講解下哦。
  一、浸泡式
  1.吸干或甩干孔內反應液;
  2.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
  3.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;
  4.吸干孔內液體,吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
  5.重復操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,可增加酶聯(lián)診斷試劑洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。
  二、流水沖洗式
  開始用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續(xù)沖洗 2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡便、快速。已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。酶聯(lián)診斷試劑洗滌時設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。

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