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當(dāng)前位置：上海聯(lián)碩生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>PVDF膜轉(zhuǎn)印膜要如何使用
PVDF膜即聚偏二氟乙/烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白質(zhì)印跡法中常用的一種固相支持物。
PVDF本質(zhì)是一種疏水性的聚合物，在水溶液中不會浸濕，為了在水性緩沖液和系統(tǒng)中使用PVDF膜，首先必須將其浸泡在50%(v/v)或更高濃度的醇溶液中。
PVDF膜在使用時(shí)需預(yù)處理，用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團(tuán)，使其更容易與帶負(fù)電的蛋白結(jié)合。
甲醇、乙醇和異丙醇都適合浸泡這種膜。
隨著膜的外觀從不透明到半透明，浸濕是顯而易見的。之后必須用水反復(fù)沖洗以去除醇類，經(jīng)預(yù)處理的膜可以直接放入轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡。
一旦膜被浸濕，蛋白結(jié)合可通過蛋白與膜的接觸而實(shí)現(xiàn)。
由于蛋白與膜的結(jié)合貫穿整個(gè)膜的厚度(深度)，結(jié)合能力是由孔的內(nèi)部表面積來決定的，隨著膜孔徑的不斷減小，膜對低分子量的蛋白結(jié)合就越牢固。
0.2um PVDF膜內(nèi)部表面積大約是0.45um PVDF 膜的三倍，使其吸附能力更高。PVDF膜是疏水性的，一般大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜。
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