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上海聯(lián)碩生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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配置瓊脂糖凝膠的方法

時(shí)間:2024/1/29閱讀:908
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1.用于制備膠液的錐形瓶體積應(yīng)為膠液體積的2-4倍,緩慢向緩沖液中加入瓊脂糖,邊加邊攪拌,防止瓊脂糖聚集。記錄瓶體和溶液總重量。
2.微波爐高火加熱30s,根據(jù)配制的溶液體積調(diào)整加熱時(shí)間。加熱時(shí)間與微波爐、瓶體大小和瓊脂糖濃度有關(guān)。
3.搖勻瓊脂糖溶液。
4.再次高火加熱30s,搖勻瓊脂糖溶液。
5.將溶液再次放回微波爐,高火加熱至沸騰(大約10-35s)。接觸移動(dòng)時(shí)瓊脂糖膠液可能會(huì)劇烈沸騰,小心操作,避免燙傷。從微波爐拿出后,室溫冷卻1-2min,輕輕搖晃使液體里的氣泡溢出。
6.重新放回微波爐,高火加熱,使之沸騰約15s,觀察瓊脂糖的溶解狀態(tài),如果仍有顆粒存在,重復(fù)該步驟直至所有晶體全部溶解。
7.待瓊脂糖溶解成液體,重新稱量總重量,計(jì)算蒸發(fā)液體量,用水補(bǔ)齊至原始重量,搖勻液體。
8.建議膠液冷卻至50-55℃時(shí)灌膠,有利于凝膠孔徑均勻一致,不至于損傷制膠儀。灌膠前輕輕搖晃瓊脂糖溶液,釋放膠液中殘存的氣泡。
9.向制膠槽中灌膠,一般膠的厚度3-5mm,灌膠后盡量排除梳孔之間或底部的氣泡。
10.在室溫放置(30-45min)使膠充分凝結(jié)。

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