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您知道ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)洗滌的重要注意事項(xiàng)嗎?

時(shí)間:2023/9/12閱讀:1113
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洗滌是ELISA實(shí)驗(yàn)中是最多次數(shù)的操作,也是非常重要的步驟。不嚴(yán)格的洗滌容易出現(xiàn)洗不干凈或交又污染現(xiàn)象,實(shí)驗(yàn)重復(fù)效果差的現(xiàn)象。

不管用多道加樣器、洗瓶、吸管,還是洗板機(jī),嚴(yán)格按照說明書操作不要減少步驟洗滌的洗滌體積、洗滌時(shí)間和洗滌次數(shù)。注意標(biāo)準(zhǔn)化操作將減少實(shí)驗(yàn)誤差和不同實(shí)驗(yàn)之間的誤差。操作者常出現(xiàn)洗板不干凈現(xiàn)象,請(qǐng)比照“手工洗板小貼士"操

1.洗液不要溢出孔外,以免污染相鄰的孔,特別是每次洗板的前兩遍,若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔,其造成的交叉污染的孔是洗不掉的,背景肯定會(huì)增高。

2.特別注意:設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候要考慮實(shí)驗(yàn)孔的位置保證甩掉洗液時(shí),空白孔、低濃度孔或陰性對(duì)照組在上面或一側(cè)或分開最好。同時(shí)注意甩掉洗液的動(dòng)作翻轉(zhuǎn)(從正上方旋轉(zhuǎn)120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右搖擺、旋轉(zhuǎn)來甩液體!甩出后以直線方式補(bǔ)2-3次甩出液體。

3.用干凈的濾紙,不要用衛(wèi)生紙,因?yàn)榧?xì)小粉塵或者碎屑容易吸附到孔底,導(dǎo)致洗板不干凈,結(jié)果偏高或偏低,重復(fù)孔的數(shù)值也會(huì)相差很大。

4.每次拍板不要重復(fù)在一個(gè)地方拍,特別是洗去酶的步驟;拍板不宜過輕,否則拍不干凈,拍板很用力不會(huì)對(duì)蛋白有什么影響。但注意不要太重,以至把板條給拍斷。每次洗板后輕叩幾下,最后一次一定要扣干凈。

5.不能減少洗液體積、洗板時(shí)間和次數(shù)。洗板時(shí)間太短,洗板效果不佳。延長洗板時(shí)間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈。

洗滌是ELISA實(shí)驗(yàn)中是最多次數(shù)的操作,也是非常重要的步驟。不嚴(yán)格的洗滌容易出現(xiàn)洗不干凈或交叉污染現(xiàn)象,實(shí)驗(yàn)重復(fù)效果差的現(xiàn)象。

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