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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
中級會(huì)員 | 第18年

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研域解析:如何讓ELISA實(shí)驗(yàn)體系更穩(wěn)定?

時(shí)間:2019/12/5閱讀:1572
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ELISA檢測體系能夠說是現(xiàn)在運(yùn)用多的檢測方法,并且技術(shù)手段很多,對于花板,假陽性,全顯色,全部顯色,顯色比空缺還低,這些都起到了至關(guān)重要的效果,一定要多留心,那么elisa檢測體系穩(wěn)定,這些實(shí)驗(yàn)進(jìn)程都要留心。

 

應(yīng)留心以下原理:由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體外表的疏水基團(tuán)間的效果,這種物理吸附長短特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),故更易吸附到固相載體外表。小分子必需依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。
 

還有有的包被原或許不是蛋白,對于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事前對其改造再加以包被,親和素生物素:先親和素先包被載體,參加生物素化的DNA,這種包被方法平均、結(jié)實(shí),已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。
       

包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不能夠被其識別,所以保留抗原很重要。feng鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地閑暇,然后排擠ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。但有時(shí)由于試驗(yàn)的需要,包被原的特殊性也或許選用中性的緩沖溶液來包。
 

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