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紫外分析儀的作用原理
閱讀：1005 發(fā)布時(shí)間：2023-3-27
一、系列分類：有三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、可照相紫外分析儀等系列，不同的紫外分析儀有不同的用途。紫外分析儀采用不同波長(zhǎng)引進(jìn)電泳分析、檢測(cè)，PCR產(chǎn)物檢測(cè)，DNA指紋圖譜分析，紙層分析或薄層分析等。
二、發(fā)展原理：熒光技術(shù)是某些物質(zhì)受一定波長(zhǎng)的光激發(fā)后，在極短時(shí)間內(nèi)(10-8秒)會(huì)發(fā)射出波長(zhǎng)大于激發(fā)波長(zhǎng)的光，這種光稱為熒光。這一發(fā)光現(xiàn)象在各方面的應(yīng)用及有關(guān)的方法稱為熒光技術(shù)(fluorescenttechnique)。
三、第一種是自發(fā)熒光，如葉綠素、血紅素等經(jīng)紫外線照射后，能發(fā)出紅色的熒光，稱為自發(fā)熒光；第二種是誘發(fā)熒光，即物體經(jīng)熒光染料染色后再通過(guò)紫外線照射發(fā)出熒光，稱為誘發(fā)熒光。
四、作用方法：
(1)定量測(cè)定：利用在較低濃度下熒光強(qiáng)度與樣品濃度成正比這一關(guān)系可以定量分析樣品中熒光組分的含量，常用于測(cè)定氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸的含量。熒光定量測(cè)定的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高，例如維生素B2的測(cè)定可達(dá)1毫微克/毫升，這一優(yōu)點(diǎn)使測(cè)定時(shí)所需要樣品量大大減少。
(2)這種定量測(cè)定方法還可應(yīng)用于酶催化的反應(yīng)，只要反應(yīng)前后有熒光強(qiáng)度的變化，就可用來(lái)測(cè)定酶的含量及酶反應(yīng)的速率等。
(3)利用熒光壽命、量子產(chǎn)率等參數(shù)可以研究生物大分子中的能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象：通過(guò)該現(xiàn)象的研究，可以獲得生物大分子內(nèi)部的許多信息。將一些特殊的熒光染料分子共價(jià)地結(jié)合或吸附在生物大分子的某一部位，通過(guò)測(cè)定該染料分子的熒光特性變化來(lái)研究生物大分子，這種染料分子被稱為“熒光探針”，它們發(fā)出的熒光一般稱為外源熒光。