邻近标记质谱法检测技术服务详情介绍

邻近标记质谱法（Proximity Labeling Mass Spectrometry, PLMS）是用于研究dànbáizhì相互作用和dànbáizhì在细胞内空间分布等的技术。其基本原理是通过标记邻近的生物分子，以便于后续的质谱分析识别和量化。邻近标记质谱法结合了化学标记与高分辨率质谱的优势，能够识别dànbáizhì间的相互作用、dànbáizhì的空间定位以及动态变化等信息。邻近标记质谱法的核心在于“邻近标记”这一步骤。通过将标记分子与特定的蛋白或核酸相结合，利用生化反应使得标签分子在一定的空间范围内展开，并对邻近的目标分子进行标记。随后，这些被标记的分子通过质谱技术进行检测和分析。这一技术步骤的关键在于标记反应的高效性和特异性，以确保目标分子的准确标记及后续的jīngquè检测。通过邻近标记质谱法，可以实现对复杂生物样本中低丰度dànbáizhì的高灵敏度检测，同时提供丰富的定量及定性信息。

邻近标记质谱法的应用领域极其广泛。例如，在癌症研究中，这种技术可以用于解析癌细胞特异性dànbáizhì相互作用网络，为靶向治疗提供潜在的药物靶标；在神经科学中，该方法能够帮助研究人员揭示神经细胞的通讯机制和突触连接的动态变化；在免疫学研究中，邻近标记质谱法可用于研究免疫细胞的信号传导路径，从而提高对免疫反应机制的理解。此外，该技术在新型诊断标志物的发现、疫苗开发以及环境科学中也展现出潜力。

一、常用的邻近标记方法

1、shēngwùsù连接酶介导的邻近标记（BioID）

将目标蛋白与shēngwùsù连接酶 BirA融合表达，BirA可以将shēngwùsù标记到与其空间距离较近（一般在 10 纳米左右）的dànbáizhì上。经过一段时间的标记后，细胞内与目标蛋白邻近的dànbáizhì被shēngwùsù标记，然后利用链霉亲和素磁珠富集shēngwùsù标记的dànbáizhì，再通过质谱分析鉴定这些dànbáizhì。

2、过氧化物酶介导的邻近标记（APEX）

将目标蛋白与过氧化物酶 APEX 融合，APEX 在过氧化氢存在的条件下，能将shēngwùsù - 酚等底物氧化成具有活性的中间体，这些中间体可以与邻近的dànbáizhì上的氨基酸残基发生共价结合，从而实现对邻近dànbáizhì的shēngwùsù标记。后续同样通过链霉亲和素磁珠富集和质谱分析来鉴定标记的dànbáizhì。

二、邻近标记质谱法实验流程

1、构建融合蛋白表达载体

将编码目标蛋白的基因与编码标记酶（如 BirA * 或 APEX）的基因连接，构建成融合蛋白表达载体。

2、细胞转染或基因表达

将构建好的融合蛋白表达载体导入细胞中，使融合蛋白在细胞内表达。

3、标记反应

加入相应的标记底物和辅助试剂，如在 BioID 中加入shēngwùsù，在 APEX 中加入过氧化氢和shēngwùsù - 酚等，让标记酶催化标记反应，使邻近目标蛋白的dànbáizhì被标记。

4、dànbáizhì富集与纯化

利用链霉亲和素磁珠等方法，特异性地富集shēngwùsù标记的dànbáizhì，并进行纯化，去除未标记的dànbáizhì和其他杂质。

5、质谱分析

将纯化后的dànbáizhì样品进行质谱分析，通过质谱仪检测dànbáizhì的质量和序列信息，再与dànbáizhì数据库进行比对，鉴定出被标记的dànbáizhì。

与传统的dànbáizhì相互作用研究方法（如酵母双杂交、免疫共沉淀等）相比，邻近标记质谱法可以在细胞内原位进行标记，更能反映dànbáizhì在天然状态下的相互作用和空间分布情况，能够提供dànbáizhì的空间分布信息。百泰派克生物科技提供zhuānyè的邻近标记质谱分析服务，致力于帮助研究人员实现复杂生物样本的高效分析。我们的团队拥有丰富的经验，能够为客户提供量身定制的解决方案，并保证结果的高度准确性和可靠性?；队鹘缈蒲腥嗽庇胛颐呛献?，共同探索生命科学的奥秘。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对dànbáizhì序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对dànbáizhì的氨基酸组成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服务。对于未知理论序列的dànbáizhì，提供基于从头测序法的dànbáizhì从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上*的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、dànbáizhì组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量dànbáizhì组学、靶向dànbáizhì组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种dànbáizhì组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种dànbáizhì标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.zhuānyè生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，zuì后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术*，*技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题?？稍诘ハ赴忝嫔隙远嘀种副晖苯斜碚?，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从zuì小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从dànbáizhì、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等zhuānyè服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，zhuānyè提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖dànbáizhì组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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