分析原理：
cAMP 試劑盒基于一種競爭形式，涉及用穴狀化合物（供體）標(biāo)記的特異性抗體和與 d2 偶聯(lián)的 cAMP（受體）。這使得能夠直接表征作用于貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞中 Gs 蛋白偶聯(lián)受體的所有類型化合物。細(xì)胞產(chǎn)生的天然 cAMP 與 d2 標(biāo)記的 cAMP 競爭結(jié)合單克隆抗 cAMP Eu3?穴狀化合物。

分析方案：
該方案簡單直接，僅需兩個孵育步驟：

通過目標(biāo)化合物刺激細(xì)胞。

使用 HTRF 試劑檢測 cAMP。

分析細(xì)節(jié)：
cAMP Gs 動態(tài)產(chǎn)品規(guī)格：
使用這個優(yōu)化的試劑盒來研究戰(zhàn)性和珍貴的細(xì)胞模型。該試劑盒設(shè)計為以最少的細(xì)胞消耗產(chǎn)生結(jié)果，具有的納摩爾級 IC50。
左移的 IC50 使你能夠定量更低的 cAMP 濃度，顯著減少所需的細(xì)胞數(shù)量。

分析驗證：

激動劑劑量反應(yīng)驗證：
表達內(nèi)源性 β2 腎上腺素能受體的 HEK293 細(xì)胞用異丙腎上腺素激動劑處理 45 分鐘。異丙腎上腺素特征明確，顯示出與文獻良好相關(guān)的正確效力。

拮抗劑劑量反應(yīng)驗證：
以 7500 個細(xì)胞 / 孔的密度（位于試劑盒動態(tài)范圍內(nèi)的最佳細(xì)胞濃度）的 HEK293 細(xì)胞用一系列濃度的異丙腎上腺素（β2 腎上腺素能受體激動劑）處理。確定 EC80 - EC90 以選擇用于拮抗劑模式實驗的最佳激動劑濃度。擬合拮抗劑的系列稀釋可以計算化合物的 IC50（效力），這與文獻相關(guān)。