裸鼠皮下成瘤模型构建动物选择

如果需要构建一个同源的肿瘤模型，应该选择相同基因的小鼠品系，如C57BL/ 6和Balb/ c，前者是广泛使用的实验室啮齿动物，因为它既健壮又容易繁殖。然而，如果需要构建异种肿瘤移植模型，则需要使用免疫缺陷小鼠。其中包括胸腺不全的裸鼠、免疫缺陷型小鼠(SCID)、 NOD /SCID等小鼠。NSG小鼠缺乏成熟的T细胞、B细胞和最自然的杀伤活性；它们在先天免疫和细胞因子信号通路中也有许多缺陷。一般来说,小鼠的免疫缺陷越严重，肿瘤移植率最高。

裸鼠皮下成瘤模型构建造模方法

1、细胞是贴壁细胞，细胞培养在 RPMI-1640 培养基中，含 10%胎牛血清，100U/mL 的青mei素，100ug/mL 的链mei素，培养在 37℃含 5%CO2的细胞培养箱中。
细胞传代培养：当细胞长至 80-90%时，去除培养基，加入 PBS 洗 1-2 次，去除 PBS后，加入 1ml 胰mei消化 1-3min 后，加入 3ml wan全培养基中和胰mei终止消化，将消化的细胞转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min。倒掉上清后，加入 3ml 培养基重悬细胞，1:3 传代至培养皿中培养。
2、将长到培养皿 80%-90%的细胞用胰mei消化下来，1000rpm 离心，去除上清，加入wan全培养基重悬细胞，将细胞分别种在 6 孔板中，每孔种 1×105个细胞。
3、待细胞贴壁后，按照 MOI=1:10 的比例加入慢病毒感染细胞，感染 24h 后，去除含病毒的培养基，加入wan全培养基。培养 48h 后，加入 puromycin 进行筛选。
4、将细胞进行扩增培养。待细胞长到zhi定数量时，将细胞用胰mei消化下来，1000rpm离心后，去除上清，加入 PBS 将细胞洗一遍，再次加入 PBS 重悬，对细胞进行计数，将数量调整为 2×107个细胞/ml。
5、8周龄15只裸鼠适应性饲养7天后，随机分为3组，每组分别在右腋皮下接种2×106（100ul/只）细胞（细胞分为对照组细胞即未处理的细胞，NC 组细胞即感染 NC 病毒的细胞，shRNA 细胞即感染 sh-RNA 病毒的细胞）。接种约两周后出现肿瘤结节，每周用游标卡尺测量肿瘤大小两次。将裸鼠放入鼠笼中正常饲养 4 周后处死裸鼠，取裸鼠肿瘤拍照冻存。