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无需预孵育!导入细胞质的蛋白转染试剂

具体成交价以合同协议为准

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富士胶片和光(广州)贸易有限公司是日本富士胶片和光纯药株式会社(FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation)在中国的子公司,主营富士胶片和光品牌试剂产品,供应产品超50,000种,囊括了生命科学、药品生产、品质管理领域、合成与材料、分析各个领域。


基于“想要为科研人员提供帮助”的创业初衷,富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)作为一家满足前沿研究领域需求的综合试剂制造商,一直致力于生产和开发高品质的产品,并于2022年6月迎来了创业100周年。通过发挥企业优势“技术力”,以及三大核心业务的试剂业务、化成品业务和临床诊断业务来满足学术界、企业以及医疗相关企业的广泛需求。


凭借100 年的历史经验,富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)在日本市场占据高份额,作为全球性的试剂供应商,以“成就科学未来之力,创造幸福源泉”为愿景,致力于高品质试剂的生产与开发。通过提供试剂,为再生医疗、癌症、精神/神经疾病和抗体药物等各类基础研究和前沿研究做贡献,并获得 ISO9001等多项国际认证?;诳煽康募际鹾推分?/span>、以及科研人员之间的信赖,作为富士胶片集团的一员将不断实现全球化发展。


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主要业务——试剂


作为富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)试剂业务的中国子公司,富士胶片和光(广州)贸易有限公司可提供各个领域测试和研究用途的生命科学试剂和化学试剂。


试剂业务

可广泛提供生命科学和化学领域的测试研究用产品



生命科学领域


化学领域



 

培养基生产

 ● 抗体制备

 ● 定制服务



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认证标准品

 ● 有机化学


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作为优质的试剂企业,我们可以提供满足不同客户需求的高品质产品。试剂业务自创业以来,已持续不断地提供了广泛领域的试剂产品,并致力于成为满足前沿技术领域各项研究需求的试剂制造商。今后也将以过往技术经验为基石,发挥作为可信赖的研究支持合作伙伴的作用。



产品一览

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● 常规试剂

● 有机合成试剂

● 环境分析试剂

● 精密分析试剂

● 色谱试剂

● 生化学用试剂

● 基因研究用试剂

● 免疫研究用试剂

● 病理研究用试剂

● 细胞培养用试剂

● 内毒素检测用试剂

● 生物药生产用培养基

● 研究用基础培养基

● 定制服务

● 设备和耗材










丰富的产品类目以及快速供应体系

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致力于持续监测市场的需求并跟踪世界的研究动向。为了能够及时准确地响应客户的需求,富士胶片和光建立了以自有品牌为中心的丰富产品体系,为各界的研究和开发领域提供细致的服务与支持 。













高品质的试剂提供和生产体系

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试剂生产工厂以东京工厂和大阪工厂为中心,发挥优质技术力量建立的高品质生产体系。爱知工厂配备齐全的培养基生产设备,可用于生产再生医疗和生物制药生产用的培养基。













优质的客户服务和产品信息

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通过定期更新的主页网站、富士胶片和光生物微信公众号、富士胶片和光化学分析微信公众号,以及不定期的富士胶片和光生物视频号、网络研讨会和线下展会,致力于为客户提供优质的服务以及不断更新的产品信息。













强化全球化事业的开展

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建立日本海外销售体系,通过提供富士胶片和光纯药(FUJIFILM Wako)优质研发力量生产的高品质产品,积极推进全球化业务。














企业历史沿革


年份

内容

1922年6月

  从武田長兵衞商店(现武田薬品工業株式会社)的化学药品部门独立出来,成立了武田化学薬品

 株式会社

1940年

  大阪工厂竣工

1944年

  東京工厂竣工

1947年

  更名为和光純薬工業株式会社

1950年

  展开化成品业务

1952年

  总部迁移至大阪

1960年

  展开临床检测药业务

1968年

  播磨工厂竣工

1972年

  公司总部竣工

1974年

  成立德国和光純薬有限会社(今?FUJIFILM Wako Chemicals Europe GmbH)

1981年

  成立美国和光純薬株式会社(今?FUJIFILM Wako Chemicals U.S.A Corporation)

1989年

  建设东部配送中心

1991年

  建设西部配送中心

2004年

  愛知工厂竣工

2012年

  成立和光純耀(上海)化学有限公司(今?富士胶片和光纯药(上海)化学有限公司)

2015年

  收购株式会社シバヤギ(今?群馬办事处)

2017年

  成为FUJIFILM Corporation的全资子公司

2018年

  更名为富士胶片和光纯药株式会社

2019年

  合并IS Japan Co.,Ltd.(今?户田办事处)

2022年

  成立100周年





























生物化学试剂、仪器和耗材

供货周期 一个月以上 应用领域 医疗卫生,生物产业

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无需预孵育!导入细胞质的蛋白转染试剂             

ProteoCarry <Protein Transfection Reagent>

 

 

本产品是将蛋白以及葡聚糖等生物大分子导入细胞内,尤其是导入细胞质的试剂。传统的蛋白转染试剂存在蛋白滞留在内体或溶酶体中的问题,但是由于本产品可以高效地将蛋白运送至细胞质,可以广泛地适用于在评价导入蛋白的细胞内功能和抗体导入引起的功能抑制诱导等的实验。另外与传统产品不同的是,本品无需与蛋白进行预孵育,所以不会形成复合体,低限度地限制其对蛋白功能的影响。

※本产品仅供研究,研究以外请勿使用。

 

 

◆蛋白转染试剂及其问题

 

蛋白转染试剂(Proteofection试剂)是将重组蛋白和抗体直接导入细胞的工具。与将质粒导入以诱导表达目的蛋白的方法相比,可以更迅速地导入目的蛋白,因而受到了广泛地关注。

虽然已经开发了许多基于肽、阳离子的脂质或聚合物的蛋白转染试剂,但它们都是与蛋白形成复合物后,通过胞吞作用摄入细胞内,破坏内体膜将其运送至细胞质。然而,现有的大部分试剂内体膜的破坏活性低,并且从内体逃脱不足,导入的蛋白大部分都转移至溶酶体降解系统。本产品是一种新型肽蛋白转染试剂,克服了传统的蛋白转染试剂的缺点,通过强有力的内体膜选择性破坏活性,高效地向细胞质运送蛋白,使转导的蛋白在细胞内发挥活性。另外,与传统的蛋白转染试剂不同,本品无需与蛋白的复合物,不仅仅是蛋白,还可以向细胞质导入生物大分子(葡聚糖等)。

 

 

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图1. 细胞导入原理的比较

 

 

图2是导入荧光标记IgG的案例。不添加转染试剂时,以内体/溶酶体的染色为主,从细胞质中无法获得荧光信号,与之相对的,可以观察到在本产品案例中,内体、细胞质被大面积染色。(详情请参照应用实例)

 

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图2. 向HeLa细胞导入荧光标记IgG的比较

 

 

◆特点

 

● 基于肽特性的蛋白转染试剂,显示出高度水溶性。

● 优异的内体膜破坏活性,与传统方法相比显示出高细胞质传达性。

● 无需与导入物质进行预孵育,可以简便且迅速地转染。

● 由于不会与蛋白形成复合物,所以需要添加浓度较高的蛋白,但是可以低限度地抑制对蛋白功能的影响。

● 只需要1小时的处理就可以充分地转染至细胞质。

● 有无血清(<10% FBS)不会影响导入效率,可以根据想要使用的细胞设计实验。

● 已有向细胞质导入各种蛋白及生物大分子的应用实例。

● 例:IgG抗体、功能性蛋白(Cre recombinase, Saponin)、多糖(葡聚糖)

● 推荐使用浓度几乎没有细胞毒性。

 

 

◆使用方法概述

 

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1. 向新鲜的培养基(无血清培养基,10%以下含FBS培养基或PBS)添加本产品以及想要导入的蛋白。

1. (配制转染混合液)。

1. ※无需预孵育

2. 用PBS清洗2次细胞(80%以下的融合状态)后,向细胞添加转染混合液。

3. 在转染混合液中培养细胞(~1h)

4. 用PBS清洗2次细胞后,添加新鲜的培养基。

5. 实现各项应用。

 

 

◆试剂盒组成

 

● ProteoCarry(4 mg)

● FITC-dextran(2 mg,阳性对照用)

 

 

实验次数的预测

 

孔板的尺寸

ProteoCarry

FITC-dextran

6 well

14 assays

5 assays

12 well

28 assays

10 assays

24 well

56 assays

20 assays

48 well

140 assays

50 assays

96 well

280 assays

100 assays

 

 

◆有导入数据的细胞

 

HeLa, SW280, COS7, NIH3T3, HUVEC

 

 

参考导入量

 

导入物

推荐培养基的终浓度

抗体

50~250 μg/mL

蛋白

Saponin

1~10 μg/mL

Cre recombinase

10~100 μg/mL

FITC-dextran
    (阳性对照)

200 μg/mL

 

※导入效率根据细胞类型,细胞数量和蛋白类型各种因素改变。以上数据仅供参考,建议每次实验都要优化数据。

 

 

◆应用实例

 

1. 向细胞内导入FITC-dextran

 

向HeLa细胞导入FITC-Dextran(培养基的终浓度为200 μg/mL),仅向细胞添加FITC-Dextran时,(Reagent(-))观察到点状的荧光信号,细胞质中几乎没有观察到信号;相反,使用本产品时扩散到了整个细胞质。

 

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实验概要:

 

向HeLa细胞(80% confluent)添加200 μg/mL FITC-dextran, 1×ProteoCarry in α-MEM,并培养1个小时。用PBS清洗细胞后,进行核染色(Hoechst)。

 

 

2. 向细胞内导入荧光标记IgG

 

向HeLa细胞导入荧光标记IgG抗体(培养基终浓度为250 μg/mL),仅有抗体添加至细胞时,可以观察到胞吞作用自发性摄入点状的荧光信号,表明抗体停留在内体和溶酶体中。另一方面,使用本产品时,不仅能观察到点状的内体结构,还可以观察到它主要在细胞质中广泛扩散。

※用荧光信号观察细胞扩散时,与内体相比,由于细胞质的体积较大,信号会被稀释。细胞质信号的检测需要添加高浓度的荧光标记蛋白,在本数据中添加了250 μg/mL的荧光标记IgG。

 

图片.png

 

实验概要:

 

向HeLa细胞(80% confluent)添加250 μg/mL荧光标记IgG,1×ProteoCarry in α-MEM并培养1小时。用PBS清洗细胞后,进行核染色(Hoechst)。

 

 

3. 向细胞内导入Cre recombinase

 

将设计为Cre recombinase不存在时表达DsRed,只有在Cre recombinase存在时发生重组表达GFP的质粒向HeLa细胞导入基因。相对于导入第二天就表达DsRed的HeLa细胞,使用本产品导入Cre recombinase(培养基终浓度为10 μM),依赖导入细胞内的Cre recombinase表达GFP,本产品在维持Cre recombinase的功能下将其导入了细胞。

 

图片.png

 

实验概要:

 

向HeLa细胞转染质粒的第二天,向HeLa细胞添加10 μM Cre recombinase, 1×ProteoCarry in α-MEM,并培养1小时。用PBS清洗细胞后,用新的培养基再培养24小时。


 

◆保存

 

● 运输:室温

● 保存:-20℃

 

 

◆产品列表

 

 产品编号产品名称包装
FDV-0015

ProteoCarry<Protein Transfection Reagent>

ProteoCarry <蛋白质转染试剂>

1 set

 



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