1．概述

REAGEN™ 多菌灵酶联免疫反应试剂盒用于检测蜂蜜、乳制品、果汁、稻米和饲料中多菌灵残留。

该试剂盒特点包括：

• 高回收率（80-105%）；
• 高灵敏度（0.5ng/g或ppb）,低检测限（0.5ppb蜂蜜）；
• 高重现性；
• 快速的ELISA检测方法（在不考虑样品数量下只需不到1小时）。

2．试剂盒原理

REAGEN™ 多菌灵酶联免疫反应试剂盒基于竞争性酶联免疫原理，抗原包被在酶标板孔内，分析过程中，样品和一抗、酶标二抗加入微孔中，如果样品中有毒素抗原，就可竞争与抗体结合，阻止抗体与包被的抗原结合，酶标二抗可与一抗结合从而与酶标板上包被的抗原结合。经酶催化底物发生反应颜色变化，颜色的深浅与毒素的浓度成反比。

样品前处理

蜂蜜

• 称取1g蜂蜜样品，加入1mL 1xCBD提取液；
• 加入4mL乙腈，zui大转速涡流3分钟或振荡10分钟；
• 室温（22.5±2.5）°C 4000 rpm离心5分钟；
• 取1.6mL上清液到一支新的试管中,加入约300mg(280-320mg)CBD清洗物，涡流30秒，室温下静置5分钟或4000 rpm离心1分钟；
• 取1.2mL上清液（相当于0.3g样品）到一支新试管中，60-70°C水浴中氮气吹干；
• 加入0.3mL 1x样本稀释液，涡流1分钟；
• 取80μL溶液作检测。

稀释倍数：1

果汁/牛奶

• 量取1mL样品，加入1.0mL 1xCBD提取液以及 4mL乙腈，zui大转速涡流2分钟；
• 室温（22.5±2.5）°C 4000 rpm离心5分钟；
• 取1.6mL上清液到一支新的试管中,加入约300mg(280-320mg)CBD清洗物，涡流30秒，室温下静置5分钟或4000 rpm离心1分钟；
• 取1.0mL上清液(相当于0.25mL样品)到一支新的试管中；60-70°C水浴中氮气吹干；
• 加入0.5mL 1x样本稀释液，涡流1分钟；
• 取80μL下层液作检测。

稀释倍数：2.0（注:牛奶样品要先离心去掉脂肪层，在量取进行提取操作）

稻米/饲料

• 称取1g研磨匀质样品，加入2mL 1xCBD提取液和4mL乙腈，zui大转速涡流2分钟；
• 室温（22.5±2.5）°C 4000 rpm离心5分钟；
• 取1.6mL上清液到一支新的试管中,加入约300mg(280-320mg)CBD清洗物，涡流30秒，室温下静置5分钟或4000 rpm离心1分钟；
• 取1.0mL上清液(相当于0.25g样品)到一支新的试管中；60-70°C水浴中氮气吹干；
• 加入0.5mL 1x样本稀释液，涡流1分钟；
• 取80μL下层液作检测。

稀释倍数：2.0