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薄層色譜法標準操作規(guī)程
2020年05月30日 08:40:17
來源：化工儀器網(wǎng) 點擊量：7025
薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術(shù)，常用于進行藥品的鑒別，雜質(zhì)檢查或含量測定。在使用時，會將適宜的固定相涂布于玻璃板上，成一均勻薄層，等點樣、展開后，與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比。
【化工儀器網(wǎng) 技術(shù)指導】薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術(shù)，常用于進行藥品的鑒別，雜質(zhì)檢查或含量測定。在使用時，會將適宜的固定相涂布于玻璃板上，成一均勻薄層，等點樣、展開后，與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比。
操作方法：
1. 薄層板制備：將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的泡后，倒入涂布器中，在玻璃板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2—0.3mm)，取下涂好薄層的玻璃板，置水平臺上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘。即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度。
2. 點樣：用點樣器點樣于薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊2.0cm，點樣直徑為2——4mm，點間距離約為1.5—2.0cm。點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜，點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
3. 展開：展開室如需預(yù)先用展開劑飽和，可在室中加入足夠量的展開劑，并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封室頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5—1.0cm，密封室蓋。
4. 檢測：等展開至規(guī)定距離，取出薄層板，晾干，按各品種項下的規(guī)定檢測，如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量，則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點及使用說明，結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多，故應(yīng)在保證供試品的斑點在一定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下，將供試品與對照品在同一塊薄層上展開后掃描，進行比較并計算定量，以減少誤差。
注意事項：
1. 所用玻璃板應(yīng)洗凈不掛水珠，光滑平整。
2. 鋪板要均勻，厚度適宜，并于室溫下晾干后在110℃活化30分鐘，置于有干燥劑的干燥箱或干燥器中備用。
3. 點樣點一般為圓點，不能太大。
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