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ANKOM RFS体外产气系统

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    2012年07月04日
关键词
ANKOM RFS体外产气系统
上传者
北京安科博瑞科技有限公司(ankom独家代理)
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资料简介

 

技术资料 News
ANKOM RFS型体外产气测量仪使用说明
ANKOM RFS体外产气系统
操作说明
 
北京安科博瑞科技有限公司
 
——————————————————————————————————————
 
 
 
  
1. 简介…………………………………………………
2. 安全保证………………………………………………………………
3. 仪器结构与功能………………………………………………………
4. 仪器安装………………………………………………………………
5. 仪器使用………………………………………………………………
6. 体外产气方法………………………………………………………………
7. 故障排除与仪器维护……………………………………………………
  
附录A   模块维护………………………………………………………………
附录B   实验准备……………………………………………………………
附录C   产生气体的压力换算 (psi每平方英寸磅)…………………………
附录D   配件说明…………………………………………………………
附录E   参考文献……………………………………………………
 
 
质量担保
美国ANKOM公司ANKOM Technology Corporation 担保 ANKOM RFS 体外产气系统的任何制造及材料方面的问题,在用户购买产品的6个月内承担质量担保,不包括由于疏忽或错误操作导致的仪器损坏,和不当的维护如:不当的清洁模块和阀门(见附录A??楹头诺奈ず颓褰啵绻诒P奁谀诔鱿种圃旒安牧戏矫娴奈侍?,ANKOM将负责免费维修或更换。
 
如果有关于仪器的质量担保问题,请致电
ANKOM Technology 公司:
: (315) 986-8090
传真: (315) 986-8091
 
说明书 ANKOM RFS 体外产气系统
操作温度: 0-60°C
 
 
1. 简介
ANKOM RFS体外产气系统可以自动检测动物消化后产生的气体,通过无线传输连接多个容器,反应出的气压信息可以在计算机的电子表格中记录,系统zui多可以允许50个??榈男畔⑼苯形尴叽?,通过计算机交互界面,操作人员可以控制记录间隔等参数以及打开放气阀释放气压。
 
 
2. 安全保证
 
小心危险气压– 换气过程中不要在玻璃瓶中压入超过5psi的气压,在实验时不要让瓶中的气压超过20psi(1.2bar),在操作时要带护目镜和采取适当的实验?;ご胧?。
 
注意: 没有采用制造商的方法使用仪器会损坏保护和质保。
 
在使用之前情认真阅读操作手册。
 
系统的设计达到或超过 CE, CSA, NRTL 和 OSHA标准。
 
 
3. 系统描述
3.1 一般描述:
ANKOM RFS体外产气系统可以自动检测动物消化后产生的气体,通过无线传输连接多个容器,反应出的气压信息可以在计算机的电子表格中记录,系统zui多可以允许50个??榈男畔⑼苯形尴叽?,通过计算机交互界面,操作人员可以控制记录间隔等参数以及打开放气阀释放气压。
 
3.2 背景摘要:
ANKOM RFS体外产气系统是用来研究消化发酵和消化动力学的系统,如反刍动物以及酿酒等领域的动力学研究,还可用于合成代谢活动的研究,通过对上气口气体压力减少的测量,方法与沃伯格装置类似。
 
主要用途是研究反刍动物饲料消化过程中,测量营养物质在瘤胃里消化的数值,当瘤胃中微生物消化各种饲料成分时会产生气体,主要是二氧化碳、氢气和甲烷,在发酵后几乎仅仅是二氧化碳和甲烷,氢气一般来说已经在细菌的作用下转化成甲烷了,二氧化碳的来源有两个,酸类物质和奶类物质这两类化合物发酵产生的主要产物;另一个是来自于酸性物质和碳酸盐反应所释放的二氧化碳,在中性溶液中丙酸产物不会产生二氧化碳,所以二氧化碳更少的产生,糖和淀粉的发酵快速产生的丙酸是一个主要的zui终产物,所以气体产生率将低于预期消化率,当气体产生率存在于一个比较高水平的碳水化合物的基底上时,这种结果将被计算进去, 特别是在发酵反应的早期阶段,测量这些挥发性脂肪酸在液面上部气体和媒介能更好地解释这些实验。(见附录F-参考1和2)
 
3.3 有一个??榛杓?,允许使用者设置检测样品数量的zui大值,一个基础单元可以允许zui多50个产气??橥惫ぷ鳎扛瞿?楸槐喑坛晌?的ID和系统地址便于数据交互,空白??榭梢约锹疾慰即笃沽?。
 
3.4 RFS体外产气基本配置包括:
1. 5个气体发成??椋?RF1)每个模块包括:
不可充电电池包(#RF6)
细口瓶用户可选大?。?50ml (#7056), 500ml (#5605) 或1000ml (#7057)
排气阀门过滤器(#RF15)
2. 1个0参考??椋ㄖ徊饣肪逞沽Γ?(#RF5)
3. 1个气体发生基础和配套w/USB数据线(#RF2)
4. 光盘是计算机驱动软件和操作软件(#RF3)
 
3.5 RFS辅助基础工具包括:
1–盖子 (#7003)
1–隔膜适应装置(#RF#)
1–排气口阀门清洁工具(#RF9)
 
如上所说,一个基础单元可以支持zui多50个模块,如果是默认配置(5个??椋┬枰由?5个??榭梢允瓜低惩暾?,当需要更多的??槭?,要让ANKOM知道已有??榈哪切┍嗪攀嵌嗌伲ū热?-5),以便于新的??槟苷返谋槐喑探胂低持?,??楸嗪疟皇中丛诨啡圃谀?榈谋昵┥希扛銎宸⑸?椋≧F1)与一个细口玻璃瓶相连,一个包含50个模块的*系统,如果还想加更多模块的话,就必须加一个新的RFS基础单元,这第二个基础单元将在与*个基础单元不同的网络中交互数据,一个装置中zui多可以有5个基础单元和250个???。
 
3.6基础单元调试 — 无线电频率调制解调器
参数
输出功率: 60 mW(18dBm),100 mW
户外/射频发射范围:zui远1英里(1.6公里)
射频数据率:250,000 bps比特/秒
工作频率: 2.4 GHz/接收器
敏感度:-100dBm
工作温度:0–70°C
频段: 2.4000 - 2.4835 GHz
 
3.7 网络扩频类型: DSSS (直接序列扩频)
网络拓扑布局: 端对端Peer-to-peer, 点对点point-to-point & 点对多点point-to-multipoint
误差处理:重试& 确认
 
3.8 电源
电源电压: USB线路电源
传输电流: 300 mA
接受电流: 90 mA
 
3.9 物理性质
尺寸:4.50" x 2.75" x 1.125" (11.4 cm x 7.0 cm x 2.9 cm)
重量:5.25 oz (150 g)
天线选项:RPSMA
操作温度:0 to 70° C
 
3.10 Certifications
United States (FCC): OUR-XBEEPRO
Canada (IC): 4214A-XBEEPRO
Europe (CE): ETSI
Australia: Approved
Class I Division 2:
When operating in Europe: XBee Modems will be configured to operate at a maximum TX power
output level of10 dBm (power level is set using AT commands). Additionally, European regulations
stipulate an EIRP power maximum of 12.86 dBm (19mW)
 
3.11 LED灯显示如下:
黄灯(顶部) =串行数据输出
绿灯(中部) =串行数据输入
红灯(底部) =电源指示
 
RSSI接收信号强度指示灯
3 LED亮=非常强的信号
2 LED亮=强的信号
1 LED亮=中等强度信号
0 LED亮=弱信号
 
 
4. 安装
4.1 安装驱动软件
 
注意: 在下边所说的第5步之前不要把基础单元插入USB端口
 
要求:
Windows XP或Vista操作系统
Internet Explorer 5.0 或更高 .Net 和Windows安装程序
(如果需要则要安装必要的程序
1. 放入产品配套光盘,选择 启动程序。
2. 根据提示安装程序。
3. 安装程序将会把ANKOM气压监控程序(GPM)和必要的软件装入,如果需要将同时安装基础单元所需的软件。
4. 气压监控程序(GPM)会自动安装并在计算机上显示,在桌面上会显示一个气体监控程序图标。
5. 将基础单元连接到USB插口,计算机会自动识别基础单元并安装正确的驱动程序。
6. 启动程序后气压监控程序会自动出现在屏幕的左上角。
 
4.2 ??樽急?/div>
1. 首先将??椋ò隳?椋┑牡绯匕沧昂煤笤诵谐绦颍扛隽雍玫绯氐哪?榻允驹谄聊簧希缓蟾呛酶亲?。
将电池的接头与电路板的接头相连。对齐红色端。
 
注意!! 确定好接线的方向,否则系统过热将损坏电路板,确保两个接头的红色端处在同一个方向对齐。
电池包(# RF6)放到海绵泡沫上以?;さ缏钒濉?/div>
 
电池寿命说明:
下表列出了3种不同的间隔时间对电池寿命的影响
延长电池使用寿命的方式有:
• 当??椴挥檬卑纬龅绯匕?。
• 检测时设置比较长的间隔时间。
间隔时间
电池寿命
1 秒
50 小时
10 秒
500 小时
60 秒
3,000 小时
 
2. 在将??榕浔傅南缚诓A孔霸谀?樯现?,先在瓶子中插入放气阀过滤装置,玻璃瓶顺时针方向拧紧,密封圈会在拧紧瓶子时被压紧,ANKOM提供了一个瓶子开关来协助,但很多时候用手拧紧就可以了,一般来说瓶子开关只用于250ml玻璃瓶,当瓶子接口以上加水时瓶子会有压力,这可以检查瓶子的密封。
瓶子开/关(# RF14)
(仅用于250ml瓶子(#7056))
 
3. 包括可以放在恒温箱中的模块,或是放在恒温水浴中,刚好覆盖玻璃瓶可以保持温度,无线电技术使得使用者可以移动基础单元而无须笨重的连接线。
 
4.3 无线交流
基准参考0??橛Ω梅诺浇袅诨〉ピ牡胤?,所有模块都要放在一个有水浴或培养箱中以便能保持温度恒定,基础单元和模块应该放得尽量近,重要的是保持金属或柜子等物体远离基础单元及模块避免与天线接触而干扰信号,金属可以分散无线电频率信号导致系统交互延迟,模块发射的无线电频率信号被检测到的距离是10英尺或更远,要求是天线必须放的与模块足够近,如果加入更多??榈贾陆换チ吭黾?,那么使天线与??榻咏侵匾?,使用ANKOM的天线扩展线(Part # 7044, 见下图) 可以将天线与基础单元分开来延长天线作用的距离,将天线与??榻咏繁=换サ挠行?。
天线延长线 ( #7044, 上图)
安装:
1. 从基础单元上拧下天线
2. 将天线延长线拧到基础单元上
3. 再将天线与延长线相接
 
4.4 快速交互检测
快速检测系统的方法是连接一个??椋?4页),在计算机软件中点击阀门打开和关闭按钮,如果在打开或关闭时可以听到“啪”的声音则证明连接有效,阀门将开始60秒一循环,当然这要基于模块的活动时间间隔了。
 
 
5. 操作
5.1 实验前检查每个??槿范梢允褂?,见附件A检测???,记住要保持??榈奈すぷ?,见附件A保养模块。
5.2 准备好??槠俊⒒撼迦芤?、培菌液、基底和二氧化碳,模块通气装紧确保气体严密(见附件详细准备缓冲溶液和培菌液),然后将模块放入培养箱,调节合适的温度,如果用恒温水浴要确保水面不超过玻璃瓶。
5.3 点击图标启动程序将基础发射器单元连接到USB端口,核实软件检测到了基础发射器单元,字体“Any”会出现在“Coordinator”之后。
5.4 几分钟后程序会显示电池电压和每个模块的压力,包括基准参考0???,基准0模块显示周围环境的压力并且没有瓶子附加,注意:如果基准0??槊挥辛釉蚰现芪У难沽ξ?4psi。
5.5 在计算机监视器上设置活动时间为60秒用以延长电池寿命(见安装说明部分),这是设置的每个??榈氖奔渲芷?/b>唤醒或是电源开启,与基础单元和计算机交互的时间。
5.6 设置记录范围时间为分钟,这是设置每个??樵谄聊簧系牡缱颖砀竦牟裳涓?。
5.7 设置每个??榈钠故头胖?,我们建议1psi,此压力设置了在反应中??槲⒎Э即蚩氖被?,设置高于5psi可以导致气体从??榇π孤丁?/div>
5.8 点击记录按钮开始实验。
5.9 在实验结尾点击停止按钮终止实验并停止数据记录,一个Excel表格将根据所得数据建立,输入文件名按保存按钮可以创建一个Excel表格,程序将正常继续运行。
5.10 每次用后清洗排气阀并涂油,并检查排气阀滤垫(见附件A??楸Q?。
 
 
6. 清洁方法
清洁方法 #1
产气??榭梢韵馎NKOM DaisyII体外培养箱一样清理,在加瘤胃液前也就是??椴A恐匦伦吧现?,加入CO2 直到溢出??椴A课梗浜煤笠瓶茏硬⒀杆倥∩夏?椴A?,为每一个产气??橹馗创瞬僮?。
 
清洁方法 #2
每个产气模块有一个手工洗气阀(像汽车轮胎的气阀一样),可以用来从??椴A恐星宄跗扛瞿?橐灿幸桓龅缱硬啾叻牌?,它只能通过产气??槿砑℅PM)来控制,每个瓶中加入缓冲溶液和瘤胃液时要用CO2清洗,加瘤胃液移开??椴A渴币肅O2通入,当填充好瘤胃液后安装好??椴A?,在计算机产气软件中点击“开启放气阀”按钮在你刚刚清洁好的相应序号??樯希饨舨啾吲牌?,用CO2钢瓶连接合适的阀门让CO2通过洗气阀充入模块玻璃瓶,然后冲入CO2当感觉确实没有氧气在模块玻璃瓶中就可以了,当??椴A恐械难沽咏?时,在软件中取消选择“开启放气阀”按钮为相应的??槠抗乇辗牛馗床僮髅恳桓霾?椤?注意:在洗气时不要应用超过5 psi (.3 bar)的压力在??椴A恐?,或是在运行时不要超过20 psi的压力,在瓶中洗气时要调节进气压力保持在5psi或以下。
 
 
7. 气压监控程序主界面
屏幕上的各个部件(#1-14) 在下一页说明
气压监控软件使得用户可以控制许多变量,当软件运行时确定交互端连接到USB端口,软降将自动选择基础单元驱动运行。
 
7.1 自动保存功能:
GPM程序在*次记录分析时就做了备份文件,当每次记录成功时便覆写文件,包括从运行开始时的所有数据。
如果GPM程序关闭再重新启动时,文件覆盖原来的上一次分析将丢失。
然而如果是由于计算机出了问题或是断电等,在你已经从备份文件中取出数据之前不要启动新程序,一旦启动新程序文件就被覆盖。
下面是备份文件的位置,需要插入计算机的名称用以代替“QCLAPTOP”c:\documents and settings\QCLAPTOP\local settings\temp\GPM Autosave.xls
自动保存文件名称为“GPM Autosave.xls.”,找到C盘下的文件夹,不同操作系统将略有差别。
 
7.2 气压监视器屏幕
屏幕上包括所有操作控制和数据位置用于系统的操作和数据收集,下面是前一页各个分项(#1-14)的详细说明。
 
1. 活动间隔 – 每个模块“唤醒”的时间间隔或者说激活睡眠模式和计算机的交互,间隔可以设为zui多60秒,在设置期间通常时间框被设置成非常短的间隔,用以允许快速的反应手动要求,在实验阶段则可以设置60秒的间隔时间,以保存电池电量。
2. 记录范围 – 这是记录压力读数间隔的时间框
3. 开启阀门 – 同时打开所有阀门的数字控制按钮
4. 关闭阀门 – 同时关闭所有阀门的数字控制按钮
5. 记录 – 开始记录气压数据的数字控制按钮
6. 停止 – 停止记录数据结束实验的按钮
7. 消耗时间 – 这是记录实验数据的消耗时间
8. 保存 – 这个按钮将激活“保存实验结果”窗口,允许选择一个Excel文件名和文件地址,用于电子表格的数据显示在屏幕上。
9. 瓶子号码 – 分别对应每个??楹怕耄诩扑慊杏邢嘤Φ氖侗?/div>
10. 阀门开启 – 数字控制选框可以开启放排气阀并且显示划√,再次点击数字选框可以取消划√并关闭排气阀,这个操作不能用于实验中,因为计算机不能记录任何操作中丢失的记录。
11. 压力释放 – 这是各气体??閦ui大压力设置,如果压力升到这个数值以上,放气阀将短暂的开启释放气体在下一个活动间隔时,计算机自动计算压力损失在阀门放气期间,如果没有手动输入数值,默认的压力设置是10psi,一旦压力释放值被输入计算机屏幕上的方框内,按“Tab”或“Enter”键来激活??椋柚酶哂?psi可以导致气体从??榇π孤?,我们建议在实验期间用1psi压力。
12. 当前压力 – 这个值是zui近的活动间隔读取的压力值报告,如果这个框变成红色,表明模块已经至少3分钟没有和计算机交互信息了。
13. 累计压力 – 这个值是整个实验中产生的压力总值。
14. 电池状况 – 这个表明电池电压,当电压高于5.2伏时这个框是绿色的,当电压在5.2 – 5.0伏之间时是黄色的,当电压低于5.0伏时是红色的,尽管??樵?.0伏时可运行,但是没有充足的电量来继续持续不断的操作阀门。
 
 
8. 从体外产气系统中采集气体
 
利用注射器抽取气体检测是可以的,需要通过隔膜装置( # RF7),通过螺丝拧在侧气口上,确保在螺纹处包裹橡胶带以保持紧密,当隔膜放好后就可以用注射器针头插入隔膜中,当针头到位时抽出活塞到合适的距离,这将制造一个真空,当系统操作时,改变“活动间隔”为10,60秒后设置阀门开启,压力将低于瓶子压力当前值,一旦压力释放值被计入方框中在计算机屏幕上,按“Tab”或“Enter”键来激活???,不要点击“阀门开启”按钮,阀门将开始开启和关闭用以释放压力,然后气体便可流入注射器中,根据所需气体体积可以让阀门循环几次。
 
附录A
??槲?/b>
??椴馐?/b>:
1. 实验前检查每个??槿繁9ぷ髡?,把电池插到想要使用的模块上,确认在气体监视器软件上可以识别见到(见 14 页)。
2. 一旦连接好??椋谋?ldquo;活动间隔”为10秒和“记录范围”为1分钟,装上玻璃瓶。
3. 按记录开始。
4. 在玻璃瓶中压入5~10psi通过??樯系南雌?,证实屏幕上??橛醒沽?,注意:不要应用超过20psi。
5. 监视压力在5~10psi之间,确信没有重大的压力降低,一些小的改变如手动操作和环境温度等是正常的。
6. 点击“开启阀门”按钮为每个测试的???。
7. 查实排气阀开启后??榈钠菇档停ǜ萘恿硕嗌倌?樯柚?~60秒释放)。
8. 查实气压下降到0。
 
简单的检查??榻换パ沽π畔?,保持压力,以及排气阀工作正常。
 
如果模块不能保持压力,在计算机上取消选择“开启阀门”按钮,在洗气阀门重新应用5~10psi压力,放置??樵谝桓龈删坏牟A渲?,保持足够的水面可以覆盖洗气阀门和侧排气口,泡沫出现在瓶子连接处、洗气阀门或侧排气口则显示那里有泄漏,如果泄漏是在瓶子连接处,见ANKOM的Service Procedure #116,如果泡沫在洗气阀门则要更换,订一个新的洗气阀门( #7011),见Service Procedure #121更换洗气阀门和过滤垫,如果泡沫在侧排气口,则要清理阀门,见排气口清理部分的正确程序,如果清洗阀门后还有泡沫请ANKOM返还???。
 
长期使用微?;嶙璋牛繁7懦中饭δ?,下列是重要的:
 
排气阀润滑:
 
将RF模块放倒然后滴入低粘度仪器润滑油,比如“Kroil”在排气阀门口,润滑油可以进入阀门帮助润滑和减少污染。
 
润滑油“Kroil”可以直接从ANKOM(Part #RF17)购得。
 
排气阀过滤:
 
当用RF1模块时候总是要使用排气阀过滤垫(#RF15),在装上??榍敖殴说娣湃氩A烤?,确认过滤垫有一个橙色PH试纸在顶部开口,每6个月或更短如果试纸变红更换过滤垫。
 
RF15 排气阀过滤垫 插入过滤垫在瓶颈处
 
排气阀清洁:
 
如果排气阀变得污染不能适当操作了,可以用清洁方法清洗,从侧排气口(见插图),利用排气阀清洁工具(RF9)溢流,包括一个注射器配合接头在侧边排气口。
 
1. 在需要清理的相应??榧觳?ldquo;阀门开启”按钮。
2. 从??樯弦谱卟A俊?/div>
3. 拧紧注射器在侧排气口上。
4. 将充满的热的肥皂水挤入侧排气口并且重复,如果水没有从底部排气口涌出,则软件没有开启阀门,如果是这种情况,重复选择“阀门开启”按钮在程序中。
5. 将充满的热的清洗水通入侧排气口并重复。
6. 移开注射器将清洗水强制通风清除掉。
 
??榍褰啵?/b>
??橥獗呖梢杂萌确试硭褰嗟?b>不可以放在水下。
 
 
附录B
缓冲溶液、培养液和样品准备
缓冲溶液准备:
1. Kansas State堪萨斯大学缓冲溶液见参考ref. 5)
溶液 A 克/升
KH2PO4磷酸二氢钾 10.0
MgSO4?7 H2O硫酸镁,七水0.5
NaCl氯化钠0.5
CaCl2?2 H2O二水氯化钙0.1
Urea (optional) 0.5
溶液B 克/100毫升
Na2CO3碳酸钠 15.0
Na2S?9 H2O九水硫化碱1.0
将20mL溶液B和1000mL溶液A混合调PH值为6.8用B溶液在每次使用之前。
 
2. Goering - Van Soest 缓冲溶液 见参考ref. 3)
体外瘤胃缓冲溶液
蒸馏水 1 liter
NH4HCO3碳酸氢铵4 g
NaHCO3碳酸氢钠35 g
 
Resaruzin 0.1% (w/v)
溶解 0.1 g resaruzin 在 100 ml dH20
 
体外常量矿物质溶液
CaCl2?2 H2O 13.2 g
MnCl2?4H20 10.0 g
CoCl2?6 H2O六水氯化钴1.0 g
FeCl3?6 H2O六水三氯化铁8.0 g
 
体外瘤胃常量矿物质溶液
蒸馏水 1 liter
Na2HPO4 anhydrous焦磷酸四钠5.7 g
KH2PO4 anhydrous磷酸二氢钾6.2 g
MgSO4?7 H2O水硫酸镁6 g
 
还原溶液
半胱氨酸溶液 625.0 mg
1N NaOH 4.0 ml
蒸馏水 95 ml
Na2S·9H2O九水硫化钠625.0 mg
用蒸馏水定容100mL
 
3. Cone’s 缓冲 / Mineral Solution (see ref. 4)
克 /升
NaHCO3碳酸氢钠8.75
NH4HCO3碳酸氢铵1.00
Na2HPO4磷酸氢二钠1.43
KH2PO4磷酸二氢钾 1.55
MgSO4?7H2O七水硫酸镁0.15
Na2S硫化钠  0.52
CaCl2?2 H2O二水氯化钙0.017
MnCl2?4 H2O 0.015
CoCl2?6 H2O 0.002
FeCl3?6 H2O 0.012
Resazurin (可选) 0.125
 
保持所有玻璃器皿39°C
配置足够的缓冲溶液为计划的体外产气??槭克τ?,每个模块玻璃瓶能够放200mL缓冲溶液,(如果用500mL或1000mL的玻璃瓶要乘以合适的倍数),一个小一些的量需要预留出多一些用以调节更多的样品量,准备和预热缓冲溶液,分析20个样品用提供的缓冲公式,混合~340 mL溶液B到1600mL溶液A中(1:5比例),确切的数量A到B应该在调整PH值到6.8在39°C时,没有必要进一步调节PH值,在每个??椴A恐屑尤?00mL混合PH正确的溶液,参考玻璃瓶的温度,在39°C时调节缓冲平衡20到30分钟,在模块玻璃瓶中加入样品用缓冲溶液调节平衡,当缓冲溶液平衡时准备瘤胃培养液。
 
培养液准备:
预热2个2L热水瓶填充39°C的水,在放入瘤胃液之前倒空热水,用适当的方法将600到1,000 ml瘤胃液转移进瓶子,包括大约2个"fistfuls"纤维垫在热水瓶中收集的瘤胃液,将瘤胃液和纤维垫从瓶子中倒入搅拌器,在30秒之内快速用CO2气体清理搅拌容器,混合为了赶走被附在垫上的微生物确保典型的微生物群为发酵,通过4层滤布过滤混合消化物放入预热(39°C)的烧瓶中,注意:为额外的滤布留出余地绕在边缘促进挤压过滤垫的成分,烧瓶应该被不断地用CO2清理在转移瘤胃液的之前和之后,注意保温。
在每个??椴A恐屑?5mL瘤胃液到平衡缓冲溶液和样品中,用CO2气体清理玻璃瓶30秒钟,一个清理系统可以在ANKOM购买,可以在一个密闭系统中清理,没有清理系统移除玻璃瓶时要让CO2通入其中,重复为每个玻璃瓶操作,注意:不要让CO2通入缓冲液下产生泡沫,要让CO2形成一个气垫覆盖在玻璃瓶中的成分之上。
 
样品准备
加入??橹械难分柿浚ɑ祝┪?g饲料样品,zui低限度可发酵基底到0.25g高度,可发酵的基底比如高淀粉日粮,除可发酵基底质量之外,孵化持续时间必须被计算进去,基底和缓冲溶液的量要满足24小时消化但是不要超过48小时,在保温培养期结束时测量PH值,决定是否缓冲溶液还可以适当保持PH值,这样可以允许你改变基底样品配额以适合预期培养阶段。
 
准备样品、缓冲溶液和瘤胃液中,确保消化瓶保持39°C的温度,在整个期望的数据捕获阶段。
 
附录C
累计压力转换成气体产生mL
发酵导致的压力增长产气过程是psi显示,气压产生增加可以被转换成气体的物质的量用“理想气体方程”,在标准状况“S.T.P”下可以转换成mL(标准大气压;0° C, 1 个大气压, 1摩尔气体占有的体积是22.4 L, 阿佛加德罗定律Avogadro’s Law 在39°C 时是25.6 L)。
 
理想气体方程,引入单位摩尔
n =Vp / RT
 
n = 气体的物质的量mol
V = 气体体积L
p = 气压kPa
T = 温度 开尔文(K)
R = 气体常量(8.314472 L?kPa?K-1?mol-1)
 
温度39°C,压力psi, 公式可简化为:
 
39°C = 312 Kelvin
1 psi = 6.894757293 kilopascal
1 mol atmosphere at 39°C will occupy 25.6 L
R = 8.314472 LkPa·K-1·mol-1
Vx / 25.6 = VjPpsi x 6.894757293 / 8.314472 x 312
Vx = VjPpsi x 6.894757293 / 8.314472x312 x 25.6
Vx = VjPpsi x 0.068004084
Vx = gas volume at 39°C in ml
Vj = headspace of digestion jar in ml
Ppsi = cumulative pressure recorded by Gas Monitor System software
 
给出了产生气体的总体积,下面公式表示每100mg基质的气体产生:
ml per 100mg = ml gas / (mg of substrate/100)
 
 
附录D
配件及编号
 
 
附录E
参考文献
1. Theodorou, M.K., Lowman, R.S., Davies, Z.S.,Cuddleford, D., and
Owen. E., 1998, Principles of techniques that rely on gas measurement
in ruminant nutrition. Occasional Publication No. 22, British Society of
Animal Science. p. 55.
2. Pell, A.N., Pitt, R.E., Doane, P.H., and Schofield, P., 1998, The
development, use and application of gas production technique at Cornell
University, USA, p.45.
3. Goering, H.K. and VanSoest, P.J., 1970, Forage fiber analysis (apparatus,
reagents, procedures and some applications), Agricultural Handbook No. 379
ARS-USDA, Washington, DC.
4. Cone, J.W., 1998, The development, use and application of he gas
production technique at the DLO Institute for Animal Science and Health
 (IODOL), Lelystad, The Netherlands, Occasional Publication No. 22,
British Society of Animal Science. p. 65.
5. Marten, G.C. and Barnes, R.F., 1980, Prediction of Energy Digestibility
of Forages with In Vitro Rumen Fermentation and Fungal Enzyme Systems,
 in Standardiztion of analytical methodology for feeds: Proceedings of a
workshop held in Ottawa, Canada. 12-14 March 1979. Ottawa, Ont. IDRC.
 

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