三碘甲腺原氨酸（γT3）放射免疫分析试剂盒使用说明书

（FR-FJ-007）

【临床意义】

人血清3,3'5'-三碘甲腺原氨酸（γT₃）的分子量为651.04，γT₃主要在外围组织中经脱碘酶作用，由T₄转变生成且无生物活性或低生物活性，故γT₃的生成在调节T₃和T₄，维持机体zui适宜的甲状腺激素水平起着重要作用，对诊断甲状腺疾病和非甲状腺疾病均有重要作用。

【测定原理】

本药盒是利用放射免疫分析方法进行测定。在均相竞争抑制反应中采用饱和平衡法，对病人血清样品中γT₃的含量进行直接测定。测定中标准品、样品等中的γT₃与¹²⁵I-γT₃竞争*抗体的结合位。当被测样品中γT₃的含量高时，剩余的抗体结合位就少，从而与抗体结合的¹²⁵I-γT₃就少，反之结合就多。利用分离剂分离出抗原-抗体复合物，并测定复合物中的放射性计数。¹²⁵I-γT₃的结合量与样品中γT₃的含量呈函数关系，通过数据处理可求出样品中γT₃的含量。

【药盒组成及配制】

1.¹²⁵I-γT₃（红）   1瓶。

2.γT₃标准品    6瓶。使用时每瓶用1.0mL缓冲液溶解。其浓度分别为（0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2）ng/mL。

3.γT₃抗体（兰）  1瓶。

4.缓冲液        1瓶。

5.免疫分离剂    1瓶。

以上各组份均应在使用前配制且摇匀使用。

【操作方法】

1.样品采集：取晨空腹的静脉血，分离血清，备检或冰冻保存。

2.实验方法：试管编号，按下表程序操作。

     　　　　　　　　　　　　　操作表　　　　　　　　　　　　　　　      单位：μL

混匀，室温放置15分钟，离心（3500转/分）15分钟，吸弃上清液，在放免仪上测定各管沉淀的放射性计数（cpm）。

【数据处理】

1.计算机处理：建议函数模型采用三次多项式或log～logit法。

2.计算、绘图法：

计算各管的百分结合率：以S₀（cpm数）为B₀，各标准管S_i（cpm数）为B_i，求各管的百分结合率。

⑴.线性回归：用logX～logitY回归，求出r、a、b值，样品含量可由下式计算得出。

⑵.绘图法：用各标准点计算的结果，在log～logit坐标纸上绘制标准曲线图，未知样品的含量可根据B_i/B₀的百分结合率从标准曲线图上查出。

【正常参考值】

各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考：

γT₃（n=136）    0.35±0.036（0.26～0.68）ng/mL

〔0.54±0.055（0.40～1.05）nmol/L〕

【技术特性】

1.曲线范围：（0.1～3.2）ng/mL〔（0.15～4.93）nmol/L〕

2.灵敏度：＜0.05ng/mL（0.077nmol/L）

3.特异性：γT₃抗体与T₃的交叉反应＜1%，与T₄的交叉反应＜0.01%。

4.精密度：批内CVw＜6%，批间CVb＜11%。

5.稳定性：药盒未使用前（2～8）℃保存，可稳定45天。

6.单位换算：（nmol/L）=（ng/mL）×1.54

【保存及有效期】

药盒于（2～8）℃避光保存，切勿冻存。自检定合格之日起有效期为45天。

【注意事项】

1.所有试剂包括待测样品实验前应事先在室温下平衡20分钟。

2.标准品溶解后在（2～8）℃保存，可稳定四周，不要反复冻融。

3.免疫分离剂宜在（2～8）℃保存，不可冰冻。使用前应充分摇匀。

4.不同批试剂不能混合使用，每份样品都应做双管实验。

5.本实验使用放射性同位素¹²⁵I（剂量为2μCi/10mL），故应注意放射防护，放射性废物须按放射防护条例规定处理。

【参考文献】

1.Premachandra B N:Radioimmunoassay of reverse triiodothyronine.J Chin Endocrinol Metab 47:746,1978.

2.Burr WA et al:Serum triiodothyronine and reverse triiodothyronine concentrations after surgicall operation.Lamcet 2:1277,1975.

【药盒参考数据】

【三碘甲腺原氨酸（γT3）放射免疫分析试剂盒产品批号】见外包装盒