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資料簡介
免疫組化試劑盒說明書
SP-0023
HistostainTM-Plus Kits
免疫組化染色試劑盒
簡介
上海瑞齊生物科技有限公司提供的美國RD公司SP系列試劑盒，全稱為過氧化物酶標(biāo)記的鏈酶卵白素（Streptavidin/Peroxidase）染色試劑盒。該方法由美國RD公司于1986年首建。由于鏈霉卵白素的分子量是60kDa,有四個亞基可和生物素結(jié)合，等電點(diǎn)為6.5，所以該方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、背景清晰、成本低廉的優(yōu)點(diǎn)，是理想的免疫組化染色方法。
試劑盒內(nèi)容
試劑（無色液體）：3%H2O2去離子水 3ml、6ml或18ml
試劑A（藍(lán)色液體）：封閉用正常山羊血清工作液 3ml、6ml或18ml
試劑B（黃色液體）：生物素化二抗工作液（IgG/Bio） 3ml、6ml或18ml
SP-0022:生物素標(biāo)記山羊抗兔、大鼠、和豚鼠IgG
SP-0023:生物素標(biāo)記山羊抗兔IgG
SP-0024:生物素標(biāo)記山羊抗小鼠IgG
試劑C（橙色液體）:辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液（S-A/HRP） 3ml、6ml或18ml
標(biāo)本染色
1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。 7、滴加試劑B（黃色液體），
2、蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘（如需 室溫或37℃孵育15-20分鐘
采用抗原修復(fù)，在此步驟后進(jìn)行）。 8、PBS沖洗，3分鐘×3次
3、3%H2O2去離子水（無色液體） 9、滴加試劑C（橙色液體），室溫37℃
孵育15-20分鐘，以消除內(nèi)源性過 孵育15-20分鐘
氧化物酶活性。
4、滴加試劑A（藍(lán)色液體）室溫孵育15-20 10、PBS沖洗，3分鐘×3次
分鐘，傾去，勿洗 11、顯色劑顯色（DAB或AEC）
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2-3 12、自來水充分沖洗
小時或4℃ 13、如果需要，可進(jìn)行復(fù)染，脫水，透明
6、PBS沖洗，3分鐘×3次 14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
保存方法：
2-8℃避光保存。
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