蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種的特征特點(diǎn)與培養(yǎng)方法!
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種是Bacillus屬的微生物,原產(chǎn)地為中國(guó)。桿狀、G+、在芽胞囊形成期形成橢圓形芽胞及伴胞晶體,好氧,中溫,生化反應(yīng)與蠟狀芽胞桿菌大同小異,主要依據(jù)H血清學(xué)反應(yīng)分血清亞種。兼性嫌氣菌;在pH6的營(yíng)養(yǎng)瓊脂上生長(zhǎng);在含7%NaCl(W/V)的肉湯中生長(zhǎng);在含KCN的Brown培養(yǎng)基中生長(zhǎng);在檸檬酸培養(yǎng)基中不生長(zhǎng);在嫌氣肉湯+葡萄。主要用途為分類(lèi);研究,具體用途為分類(lèi),水解木糖特性。
一、菌種簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào):Bio-05041
規(guī)格:凍干物
拉丁屬名:Bacillus Thuringiensis Subsp. Galleriae
中文譯名:蘇云金桿菌蠟螟亞種
拉丁學(xué)名:Bacillus thuringiensis subsp. galleriae
原始編號(hào):3號(hào)
直接來(lái)源國(guó)家:中國(guó)
保藏時(shí)間:9/1/1970
其他保藏編號(hào)
生物危害:四類(lèi)
模式菌株:非模式菌株
菌株用途:殺鱗翅目昆蟲(chóng)
培養(yǎng)溫度:37℃
培養(yǎng)基:0002
提供形式:凍干物
用途:殺鱗翅目昆蟲(chóng)
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
二、蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種功效
1、分解出長(zhǎng)石、云母等礦物中的鉀、硅,也能分解出磷灰石中的磷,,具有溶磷、釋鉀和固氮功能,同時(shí)能在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中產(chǎn)生有機(jī)酸、氨基酸、多糖、激素等有利于植物吸收和利用的物質(zhì)。
2、本品在土壤中繁殖后,分泌植物生長(zhǎng)刺激素及多種酶。
3、菌體內(nèi)的鉀在菌體死亡后,游離出來(lái),又可被植物吸收利用。作為微生物肥料中的一種重要功能菌,可提高土壤速效鉀、磷含量,提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)等多種效。
三、蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種特征特性
營(yíng)養(yǎng)體:粗長(zhǎng)桿狀,兩端鈍圓,革蘭氏染色反應(yīng)不定,產(chǎn)生聚 β- *鹽( PHB )顆粒。菌體大小為( 1.0 ~ 1.2 ) ×? ( 2.5 ~ 7.0 ) μm? ,菌體周?chē)泻袂v膜。芽孢:壁厚,橢圓形,中生或近端生,芽孢囊不膨大或微膨大。菌落圓形,無(wú)色,隆起,膠質(zhì)粘稠,透明或半透明,邊緣整齊。好氧或兼性厭氧生長(zhǎng),水解淀粉,接觸酶反應(yīng)陽(yáng)性,氧化酶和卵磷脂酶反應(yīng)陰性,在無(wú)氮培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,生長(zhǎng)溫度 10?℃? ~ ?45?℃ 。
四、蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種特點(diǎn)
1、該菌具有解磷、解鉀的功能。
2、具有活化土壤中硅、鈣、鎂中量元素作用。
3、具有提高鐵錳銅鋅鉬硼供應(yīng)的功效。
4、提高或延長(zhǎng)肥效,減少化肥用量。
5、提高作物抗逆性,預(yù)防或減輕病害。
五、儲(chǔ)存條件
凍干菌種和試管斜面請(qǐng)置于 6-10℃冷藏。
六、培養(yǎng)條件
營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂
蛋白胨 10.0 g 牛肉侵出物 3.0 g NaCl 5.0 g
瓊脂 15.0 g 蒸餾水 1.0 L pH 7.0
七、蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種的培養(yǎng)方法
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱(chēng)取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
八、注意事項(xiàng)
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時(shí)間:細(xì)菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、菌種恢復(fù)培養(yǎng)前,建議將收到的菌種安瓿保存在 6-10°C 的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài),延遲期較長(zhǎng),如在說(shuō)明建議的培養(yǎng)時(shí)間還未長(zhǎng)起來(lái),請(qǐng)繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時(shí)或者更長(zhǎng)時(shí)間,直至菌種培養(yǎng)完成,有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng),一般來(lái)說(shuō)菌種培養(yǎng)穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3、初次使用時(shí)請(qǐng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)推薦條件和操作步驟進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng),如使用其它類(lèi)型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失,我單位不負(fù)責(zé)任。
4、恢復(fù)培養(yǎng)厭氧菌時(shí),在操作過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制厭氧條件:制作培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)使用厭氧螺口試管,并利用高純氮?dú)馊コ嚬芎团囵B(yǎng)基中的氧氣,使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲(chǔ)和操作,帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
5、與菌種相關(guān)的其它信息請(qǐng)參閱微生物菌種查詢(xún)網(wǎng)網(wǎng)站。
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