L2大鼠肺泡上皮細(xì)胞系的培養(yǎng)方式與質(zhì)量檢測!
一、細(xì)胞簡介
平臺(tái)編號:Bio-72998
規(guī)格:1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞信息:L2
細(xì)胞名稱:L2(大鼠肺泡上皮細(xì)胞)
種屬:大鼠
年齡(性別):成年
組織來源:肺
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
生長培養(yǎng)基:DMEM高糖+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃
用途:研究
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))
二、培養(yǎng)方式
1、培養(yǎng)基:L2 專用培養(yǎng)基【DMEM 高糖培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%】
2、培養(yǎng)環(huán)境:37℃、5%CO2
3、傳代培養(yǎng):當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 80%以上時(shí),可以進(jìn)行傳代,傳代比例 1:2~1:4,1~2 天傳代一次。
(1)用巴氏滴管吸出細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基;
(2)加入 1ml 的 PBS,輕輕晃動(dòng)潤洗細(xì)胞,然后將 PBS 吸出;
(3)加入 1ml 的胰酶,輕輕晃動(dòng)浸潤細(xì)胞,然后放在培養(yǎng)箱內(nèi)消化 1~3 分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間);
(4)在顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞變圓,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞便開始脫落,這時(shí)可以終止消化;
(5)加入 4ml 含血清的培養(yǎng)基,用移液器吹打細(xì)胞,使細(xì)胞脫落并形成單細(xì)胞懸液;
(6)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到 15ml 的離心管,1000rpm 離心 5min;
(7)離心完成后吸出上清丟棄,再用移液管取 10ml 培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸,輕輕吹打混勻;
(8)將細(xì)胞懸液分裝到兩個(gè)新的 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,放在 37℃的 CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
4、細(xì)胞凍存:使用本公司無血清凍存液可直接將細(xì)胞凍存在-80℃(無需使用程序降溫盒),細(xì)胞在-80℃可保存 3 年,長期保存建議使用液氮罐。
5、冷凍復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入 5mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 4-6mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6cm 皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
三、質(zhì)量檢測
1、種屬鑒定:正確
2、細(xì)菌檢測:陰性
3、支原體檢測:陰性
四、售后服務(wù)
1、收到細(xì)胞后請及時(shí)查看瓶身有無破損,是否漏液等現(xiàn)象;
2、用 75%的酒精噴灑培養(yǎng)瓶之后,放在培養(yǎng)箱中靜置 2-4 小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后用顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)并拍照記錄,40 倍和 100 倍照片各一張(細(xì)胞在運(yùn)輸過程中存在少量的漂浮或者死亡屬于正?,F(xiàn)象);
3、原瓶中的培養(yǎng)基在細(xì)胞傳代之后不建議繼續(xù)使用,請配制新的培養(yǎng)基或者購買本公司的專用培養(yǎng)基;
4、建議定期對細(xì)胞進(jìn)行拍照記錄;收到細(xì)胞后 7 天內(nèi),對細(xì)胞生長狀態(tài)有任何問題,可申請售后。
5、強(qiáng)烈建議:在次細(xì)胞傳代時(shí),使用附贈(zèng)或者購買本公司配置的細(xì)胞培養(yǎng)瓶將細(xì)胞按照 1:2 進(jìn)行傳代,可以對比測試自配的培養(yǎng)基是否可以養(yǎng)好細(xì)胞。如果有以上任何問題,請及時(shí)聯(lián)系本公司。
五、注意事項(xiàng)
1、本產(chǎn)品于科研用途,若用于臨床診斷、治療等其它用途,本公司概不負(fù)責(zé)!
2、若使用本產(chǎn)品發(fā)表科學(xué)論文,請標(biāo)注:L2 由北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司(BIOBW)提供。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有對菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù),對購買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位,都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得優(yōu)質(zhì)服務(wù)!也正因?yàn)榇耍本┌贇W博偉生物技術(shù)有限公司與國內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長期和穩(wěn)定的合作關(guān)系!
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