诺博莱德  病du基因组DNA/RNA提qu试剂盒

病du基因组DNA/RNA提qu试剂盒 质粒提取

产品货号：D0298

产品名称：病du基因组DNA/RNA提qu试剂盒

产品规格：100T/50T

产品简介：

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyderD0298  病du基因组DNA/RNA提qu试剂盒本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取病毒 DNA/RNA，不适合于细胞等组织内病毒 DNA/RNA 的提取。

使用本试剂盒提取的基因组 DNA/RNA 可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、RT-PCR 实验等。

操作步骤（仅供参考）：

使用前请先在漂洗液中加入一瓶新开启的无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签，盖好摇匀。所有离心步骤均在2-8℃条件下进行。

1.取病毒上清液0.5mL，12000rpm离心5min，尽量吸尽上清使用，弃去沉淀（如无沉淀可省去此步）。

2.向病毒上清中加入20μL 10mg/mL的蛋白酶K，充分混匀，65℃消化10min，期间可颠倒离心管混匀数次。

3.吸附柱前处理：从包装中取出吸附柱，放入收集管中，加入700μL预洗液，室温放置2min，2-8℃，12000rpm 离心 2min，弃废液，将吸附柱放入收集管中待用。

4.向病毒上清中加入500μL结合液，充分混匀。再向管中加入400μL无水乙醇，充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀，不影响DNA/RNA的提取，可将溶液和絮状沉淀都加入处理好的吸附柱中，静置2min。（吸附柱的最大容积为750μL，可分两次加入。一次吸附完离心后再将余下的混合液体加入柱中静置离心。）

5.12000rpm 离心 2min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

6. 向吸附柱中加入700μL漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

7.向吸附柱中加入500μL漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

8.12000rpm 离心 2min，将吸附柱置于室温或 50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。

9. 将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50μL-100μL经65℃水浴预热的RNase free ddH2O，室温放置 5min，12000rpm 离心 2min。即可得到高质量的病毒基因组DNA/RNA。

注意事项：

1.经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase污染。使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。提取RNA时最好在RNase free的环境中操作。

2.样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA/RNA提取量也下降。

3.若结合液中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解。

4.如果样品消化不che底，后面的离心步骤中可能会出现堵柱子的情况，可适当延长离心时间。

5.洗脱缓冲液的体积最好不少于50μL，体积过小会影响回收效率。

6.提取产物应保存在-70℃，以防基因组降解。

7.RNA 检测：得到的基因组 RNA 片段的大小与病毒的保存条件和种类等因素有关。由于病毒不含有核糖体RNA，所以常规电泳无法检测，只有后期实验才可检测到。D260值为1相当于大约40μg/mL单链RNA。

8.DNA 检测：得到的基因组DNA片段的大小与病毒的保存条件和种类等因素有关。D260值为1.0 相当于大约50μg/mL 双链DNA、40μg/mL 单链 DNA。如果病毒含量过低，最后提取的基因组DNA电泳可能无法检测到，但PCR等其他实验还会有结果。

病du基因组DNA/RNA提qu试剂盒 质粒提取

产品订购信息

D0298  病du基因组DNA/RNA提qu试剂盒  100T/50T