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产品简介
供货周期 | 现货 | 规格 | 10 ×100ul/100×100ul |
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货号 | CC96183 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药 |
产品货号:CC96183
产品规格:10 ×100ul/100×100ul
本产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。
产品介绍
ArcticExpress(DE3)感受态
产品简介
ArcticExpress (DE3)来源于 E. coli B 菌株,为 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型菌株,可促进表达蛋白的
稳定。ArcticExpress (DE3)菌株染色体 DNA 中整合了λ噬菌体 DE3 区,使得 ArcticExpress (DE3)菌
株可同时表达 T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶,广泛用于 pET 系列,pGEX,pMAL 等质粒
的蛋白表达。ArcticExpress (DE3)菌株具有四环素,庆大霉素抗性,endA1 突变有利于质粒 DNA 的
稳定。[cpn10cpn60 GentR]的存在使 ArcticExpress (DE3)可以表达适应低温的伴侣蛋白 Cpn10 和
Cpn60(来自嗜冷菌—Oleispira antarctica)。Cpn10 和 Cpn60 伴侣蛋白在 4 - 12 ℃表现出较高活性,
在 ArcticExpress (DE3)细胞中表达时,可降低重组蛋白包涵体的形成,增加可溶重组蛋白的表达量
及生物活性,比传统的原核表达伴侣蛋白 GroEL、GroES 等具有更加优异的促融性能。吐露港生产
的 ArcticExpress (DE3)感受态细胞经特殊工艺制作,pUC18 质粒检测转化效率达 108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
ArcticExpress(DE3)
感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:E. coli B F– ompT hsdS (rB– mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR]
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
ArcticExpress(DE3)感受态