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上海语纯生物科技有限公司
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具体成交价以合同协议为准
产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 货号 | CC96185 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药 |
产品货号：CC96185
产品规格：10 ×100ul/100×100ul
本产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。
产品介绍
Rosetta 2(DE3)感受态
Rosetta 系列菌株来源于 BL21 系列宿主菌，该系列菌株含有原本在大肠杆菌中稀少的真核细胞密码
子，增加了真核细胞的蛋白表达水平。Rosetta 2(DE3)来源于 Rosetta(DE3)，本菌株含有 pRARE2 质
粒，除了能够提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六个稀有密
码子的 tRNA 外，还提供了第七个稀有密码子 CGG 的 tRNA，这使得该宿主菌相对于其他大肠杆
菌，能够提供更加“通用"的蛋白质表达，从而提升目的蛋白表达水平。DE3 是溶源性的 λDE3 序列,
可表达T7 RNA聚合酶，因而适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列的载体。值得注意的是，
pRARE2 质粒具有氯霉素抗性。Rosetta 2(DE3)感受态细胞经特殊工艺制作，pUC18 质粒检测转化
效率达 108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
Rosetta 2(DE3)
感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB– mB–) dcm gal (DE3) pRARE2 (argU, argW, ileX, glyT, leuW, proL, argX)
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
除 pRARE2 外，无外源质粒 DNA 残留；
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；
4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
Rosetta 2(DE3)感受态
