联系电话
上海语纯生物科技有限公司
初级会员·1年
具体成交价以合同协议为准
产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 货号 | CC96176 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药 |
产品货号：CC96176
产品规格：10 ×100ul/100×100ul
本产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。
产品介绍
GT115 感受态
产品简介
GT115 菌株，是专门用来克隆含有发夹结构（Hairpin）或重复序列等 DNA 二级结构的基因序列的
大肠杆菌菌株。大肠杆菌中存在一种 SbcCD 蛋白复合体，可以识别 DNA 发夹结构，并将其切除；
将 sbcC 和 sbcD 两个基因突变，便增强了发夹结构 DNA 的稳定性。同时在大肠杆菌基因组中引入
uidA(?MluI)::pir-116，使 GT115 可以表达 π 蛋白，从而让含有 R6Kg ori 复制子的质粒（如 pCpG
mcs、pCpG-LacZ、pCpG-siRNA等）可以在该菌株中正常复制。该菌株还含有具有核酸酶 (endA)突
变、重组酶 (recA)突变，因此可以增强外源 DNA 的稳定性。经 pUC18 质粒转化检测，GT115 感受
态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
GT115
化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZ?M15?lacX74 recA1 rpsL (StrR ) endA1 ?dcm uidA (?MluI)::pir-116
?sbcC-sbcD
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留；
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
GT115 感受态
相关产品
-
￥面议 -
￥面议
